黄芪甲苷对舌鳞癌细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡的作用及机制

摘要

目的：探讨黄芪甲苷(AS-Ⅳ)对人舌鳞状细胞癌CAL-27细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响及其机制。方法：体外培养CAL-27细胞。不同浓度AS-Ⅳ(0、5、10、20、40、80、160μmol/L)处理CAL-27细胞24、48、72 h,采用CCK-8法检测细胞增殖情况。0、20、40、80μmol/L AS-Ⅳ处理CAL-27细胞24 h,采用Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力，流式细胞术检测细胞凋亡情况。将CAL-27细胞分为对照组、转化生长因子-β1(TGF-β1)组(10 ng/mL TGF-β1)、联合用药组(40μmol/L AS-Ⅳ+10 ng/mL TGF-β1),Transwell实验检测各组细胞迁移和侵袭能力，Western blotting分析转化生长因子-βⅡ受体(TGF-β RⅡ)、Smad4蛋白表达水平。结果：CCK-8结果显示，与0μmol/L AS-Ⅳ组比较，20、40、80μmol/L AS-Ⅳ作用24、48、72 h吸光度值均降低(P<0.05～P<0.01)。流式细胞术结果显示，与0μmol/L AS-Ⅳ组比较，20、40、80μmol/L AS-Ⅳ作用24 h均能明显诱导CAL-27细胞凋亡(P<0.01);与20、40μmol/L AS-Ⅳ组比较，80μmol/L AS-Ⅳ组细胞凋亡率明显增加(P<0.01)。Transwell实验结果显示，与0μmol/L AS-Ⅳ组相比，20、40、80μmol/L AS-Ⅳ均能明显抑制CAL-27细胞迁移和侵袭能力(P<0.01),且随着AS-Ⅳ浓度的增加，迁移和侵袭细胞数逐渐减少(P<0.01);转化生长因子-β1(TGF-β1)组细胞迁移和侵袭数明显高于对照组(P<0.01),联合组细胞迁移和侵袭数高于对照组(P<0.05和P<0.01),但低于TGF-β1组(P<0.05)。Western blotting结果显示，TGF-β1组与联合组的TGF-β RⅡ和Smad4蛋白水平均明显高于对照组(P<0.01),联合组的TGF-β RⅡ和Smad4蛋白水平均明显低于TGF-β1组(P<0.01)。结论：AS-Ⅳ可以抑制舌鳞状细胞癌CAL-27细胞增殖、迁移、侵袭，诱导细胞凋亡。AS-Ⅳ可能通过阻断TGF-β1介导的TGF-β/Smad信号通路调节CAL-27细胞的迁移和侵袭能力。

关键词

舌鳞状细胞癌 / 黄芪甲苷 / 增殖 / 迁移 / 侵袭 / 凋亡 / 转化生长因子-β1