miR-410调节NF-κB信号通路影响脂多糖刺激的牙髓干细胞增殖及炎症反应

摘要

目的：探究miR-410调节NF-κB信号通路对脂多糖(LPS)刺激的牙髓干细胞增殖能力及炎症因子分泌的影响。方法：采用qRT-PCR检测LPS刺激不同时间(0、12、24、48 h)牙髓干细胞中miR-410表达变化。将牙髓干细胞分为对照(Con)组、LPS组(10 ng/mL LPS处理48 h)、LPS+miR-NC组(转染miR-NC后经LPS处理48 h)、LPS+miR-410 mimics组(转染miR-410后经LPS处理48 h)、LPS+miR-410 mimics+PMA组(转染miR-410后经PMA和LPS处理48 h)。通过qRT-PCR检测miR-410表达，MTT实验检测细胞增殖能力，ELISA检测炎症因子白细胞介素(IL)-6、IL-1β和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平，蛋白免疫印迹法检测细胞周期相关蛋白CyclinD1及NF-κB信号通路相关蛋白p-p65 NF-κB、p-IκBα表达。结果：随着LPS处理时间延长，牙髓干细胞中miR-410表达水平逐渐下降(P<0.01)。与Con组相比，LPS组牙髓干细胞中miR-410表达水平、细胞存活率、CyclinD1蛋白表达水平均降低，IL-6、IL-1β、TNF-α水平均升高，p-p65 NF-κB、p-IκBα蛋白表达水平均升高(P<0.05)。与LPS+miR-NC组相比，LPS+miR-410 mimics组牙髓干细胞中miR-410表达水平、细胞存活率、CyclinD1蛋白表达水平均增加，IL-6、IL-1β、TNF-α水平均降低，p-p65 NF-κB、p-IκBα蛋白表达水平均降低(P<0.05)。与LPS+miR-410 mimics组相比，LPS+miR-410 mimics+PMA组牙髓干细胞存活率、CyclinD1蛋白表达水平均明显降低，IL-6、IL-1β、TNF-α水平均明显升高(P<0.01)。结论：过表达miR-410可通过抑制NF-κB信号通路促进LPS刺激的牙髓干细胞增殖能力，抑制炎症因子分泌。

关键词

牙髓干细胞 / 增殖 / 炎症因子 / miR-410 / 脂多糖