LncRNA SNHG1和miR-140-5p调控类风湿性关节炎成纤维细胞增殖机制研究

王晔; 孙丽静; 黄东芳

doi:10.13898/j.cnki.issn.2097-5252.2025.10.007

蚌埠医科大学学报 ›› 2025, Vol. 50 ›› Issue (10) : 1391 -1397. DOI: 10.13898/j.cnki.issn.2097-5252.2025.10.007

LncRNA SNHG1和miR-140-5p调控类风湿性关节炎成纤维细胞增殖机制研究

王晔, 孙丽静, 黄东芳

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摘要

目的：探讨LncRNA SNHG1靶向miR-140-5p调控类风湿关节炎（RA）成纤维细胞增殖、凋亡与自噬的作用。方法：取RA成纤维细胞培养传代获得对数生长期细胞，将细胞分为SNHG1下调组、SNHG1上调组、SNHG1对照组、miR-140-5p下调组、miR-140-5p上调组、miR对照组、pcDNA-SNHG1+miR-NC组、pcDNA-SNHG1+miR-140-5p组，另取未转染细胞设为对照组，按5×10～4个/孔接种于96孔板，每组6个复孔。转染48 h后，检测各组细胞转染效率；细胞计数试剂盒8(CCK-8)实验检测细胞增殖能力；流式细胞术检测细胞凋亡率；RT-qPCR检测miR-140-5p和Bcl-2、Bax、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱm RNA表达；Western blotting检测Bcl-2、Bax、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ蛋白表达；双荧光素酶报告基因实验、RNA免疫共沉淀（RIP）实验验证SNHG1靶向调控miR-140-5p。结果：与对照组和SNHG1对照组比较，SNHG1上调组细胞增殖能力升高，凋亡率降低（P<0.05）；与对照组和miR对照组比较，miR-140-5p上调组细胞增殖能力降低，凋亡率升高（P<0.05）；与pcDNA-SNHG1+miRNC组比较，pcDNA-SNHG1+miR-140-5p组细胞增殖能力降低，凋亡率升高（P<0.05）。与对照组和SNHG1对照组比较，SNHG1上调组miR-140-5p、Bax mRNA及蛋白表达均降低，Bcl-2、LC3-Ⅰ、LC3-ⅡmRNA及蛋白表达均升高（P<0.05）；与对照组和miR对照组比较，miR-136-5p上调组miR-140-5p、Bax mRNA及蛋白表达均升高，Bcl-2、LC3-Ⅰ、LC3-ⅡmRNA及蛋白表达均降低（P<0.05）；与pcDNA-SNHG1+miR-NC组比较，pcDNA-SNHG1+miR-140-5p组miR-140-5p、Bax mRNA及蛋白表达均升高，Bcl-2、LC3-Ⅰ、LC3-ⅡmRNA及蛋白表达均降低（P<0.05）。双荧光素酶报告基因实验和RIP实验结果证实SNHG1靶向调控miR-140-5p。结论：SNHG1可以提高RA成纤维细胞增殖、自噬能力，抑制其凋亡，促进RA的进展，可能是通过靶向抑制miR-140-5p表达，促进Bcl-2、LC3-Ⅰ、L.C3-Ⅱ表达，抑制Bax表达实现的。