基于Bax/Bcl–2/Caspase–3信号通路研究达格列净对心肌梗死猪心肌损伤的影响

摘要

目的：研究达格列净对实验猪心肌梗死后心肌损伤的保护作用，探讨Bax/Bcl–2/Caspase–3信号通路的作用机制。方法：将15只实验白猪（雌雄不限）随机分为假手术组（正常组）、心肌梗死组（模型组）及达格列净组（药物组），每组5只。HE染色观察各组猪心肌组织病理变化；实时荧光定量PCR检测各组转化生长因子（TGF）–β1、成纤维细胞生长因子9(FGF9)、斑块黏附蛋白1(FN1)、半乳糖苷结合凝集素3(LGALS3)的mRNA表达水平；ELISA检测各组心肌中白细胞介素（IL）–1β、IL–6、肿瘤坏死因子–α(TNF–α)的含量；TUNEL染色检测各组心肌凋亡细胞情况；Western blotting检测各组心脏组织中Bax、Bcl–2、凋亡相关蛋白酶（Caspase）–3、Caspase–9蛋白的表达。结果：与正常组相比，模型组心肌组织疏松水肿、心肌细胞排列紊乱且边界不清并伴有炎性细胞浸润，梗死区可见胶原沉积且由纤维组织代替；IL–1β、IL–6、TNF–α表达均升高（P<0.01），纤维化相关基因TGF–β1、FGF9、FN1、LGALS3的mRNA表达水平也升高（P<0.05）；凋亡细胞明显增多，且Bax、Caspase–3、Caspase–9蛋白表达升高，Bcl–2蛋白表达下降明显（P<0.01）。药物组干预后能显著改善心肌细胞凋亡及纤维化情况，降低TGF–β1、FGF9、FN1、LGALS3的mRNA相对表达量和IL–1β、IL–6、TNF–α的表达（P<0.01）；抑制凋亡相关蛋白Bax、Caspase–3、Caspase–9的表达（P<0.01），提高Bcl–2蛋白的表达水平（P<0.01）。结论：达格列净抑制心肌细胞凋亡及纤维化对心肌损伤具有保护作用，其作用机制与降低炎性因子IL–1β、IL–6、TNF–α的释放，抑制Bax/Bcl–2/Caspase–3凋亡信号通路有关。

关键词

心肌梗死 / 达格列净 / 细胞凋亡 / Bax/Bcl–2/Caspase–3信号通路 / 猪