miR–185–5p通过IGFBP2调节口腔鳞状细胞癌细胞的增殖、凋亡

摘要

目的：研究miR–185–5p对口腔鳞状细胞癌（OSCC）细胞增殖、凋亡的作用及其机制。方法：运用实时定量荧光聚合酶链反应（qRT–PCR）试剂盒检测72例OSCC病人的癌组织及癌旁组织及正常人口腔角质形成细胞HOK、OSCC细胞SCC–15、HSC–3、Cal–27中miR–185–5p、胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP2)的表达；脂质体法将NC组（不做任何处理）、agomiRNA组（转染agomiRNA）、 agomiR–185–5p组（转染agomiR–185–5p）、 si–NC组（转染si–NC）、 si–IGFBP2组（转染si–IGFBP2）、agomiR–185–5p+pcDNA组(共转染agomiR–185–5p和pcDNA）、agomiR–185–5p+pcDNA–IGFBP2组（共转染agomiR–185–5p和pcDNA–IGFBP2）转染SCC–15细胞。细胞计数试剂盒（CCK8）实验、克隆形成实验、5–乙炔基–2′–脱氧尿苷（EdU）染色检测细胞的增殖情况；流式细胞术检测细胞的凋亡；蛋白印迹（Western blotting）实验检测IGFBP2蛋白；双荧光素酶报告实验检测细胞miR–185–5p与IGFBP2的结合力。结果：与癌旁组织相比，癌组织（Ⅰ～Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期）中miR–185–5p表达降低，IGFBP2表达升高，且呈负相关（r=–0.412,P<0.05）;miR–185–5p高表达预示病人的3年总存活率升高。与HOK组相比，SCC–15、HSC–3、Cal–27组细胞中miR–185–5p表达降低，过表达miR–185–5p的SCC–15细胞活性、克隆形成率及EdU阳性率均降低，凋亡率升高（P<0.05）。敲减IGFBP2具有相似的作用。miR–185–5p靶向结合IGFBP2，并负向调控IGFBP2。过表达IGFBP2部分逆转miR–185–5p对SCC–15细胞的增殖抑制和凋亡促进。结论：miR–185–5p在OSCC中低表达，过表达miR–185–5p可抑制OSCC细胞增殖，促进凋亡，预测病人预后，这与靶向调控IGFBP2相关。

关键词

口腔鳞状细胞癌 / miR–185–5p / 胰岛素样生长因子结合蛋白2