基于SOX9/NF-κB/MMP-13信号通路探讨补肾痹通方含药血清对IL-1β诱导软骨细胞凋亡的影响

摘要

目的：观察补肾痹通方（BSBT）含药血清对IL-1β诱导软骨细胞凋亡的影响及可能作用机理。方法：第3代大鼠软骨细胞随机分为Control组、IL-1β组、IL-1β+BSBT(L)组、IL-1β+BSBT(M)组、IL-1β+BSBT(H)组（5%、10%、15%BSBT含药血清），分别干预24 h后采用CCK8法、流式细胞术分别检测细胞增殖情况和凋亡率；Western blot检测软骨细胞中B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白（BAX）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、性别决定区Y框蛋白9(SOX9)、磷酸化细胞核因子（NF-κB p65）、基质金属蛋白酶13(MMP-13)蛋白的表达水平；ELISA法检测软骨细胞培养上清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）水平。结果：与Control组比较，IL-1β组细胞增殖活性下降，细胞凋亡率上升，NF-κB p65、MMP-13蛋白水平和TNF-α、IL-6水平升高，SOX9蛋白水平和bFGF水平降低；与IL-1β组比较，不同浓度的补肾痹通方含药血清组细胞增殖活性上升，细胞凋亡率降低，NF-κB p65、MMP-13蛋白水平和TNF-α、IL-6水平降低，SOX9蛋白水平和bFGF水平升高；与IL-1β+BSBT(L)组比较，IL-1β+BSBT(M)组和IL-1β+BSBT(H)组细胞增殖活性上升，细胞凋亡率降低，NF-κB p65、MMP-13蛋白水平和TNF-α、IL-6水平降低，SOX9蛋白水平和bFGF水平升高。结论：补肾痹通方含药血清可能通过SOX9/NF-κB/MMP-13信号通路，促进IL-1β诱导的软骨细胞增殖，减少细胞凋亡，改善软骨细胞微环境，促进软骨修复。

关键词

补肾痹通方 / 骨关节炎 / 软骨细胞 / 信号通路 / IL-1β

基金资助

国家自然科学基金（82360934）; 新疆维吾尔自治区科技创新领军人才项目（2022TSYCLJ0007）; 新疆维吾尔自治区重点研发任务专项（2021B03006）; 新疆维吾尔自治区自然科学基金（2022D01C170;2022D01C171）