HSP90功能性抗体对胃癌干细胞干性特征作用的研究

摘要

目的：研究热休克蛋白90(HSP90)功能性抗体对胃癌干细胞干性特征的作用，并初步探讨相关机制。方法：无血清悬浮培养胃癌HGC27细胞获得细胞球细胞（Sphere细胞），HSP90功能性抗体9B8处理Sphere细胞，CCK-8法检测9B8对胃癌干细胞耐药、增殖的作用，Trans-well小室检测9B8对胃癌干细胞迁移、侵袭的作用，甲基纤维素成球检测9B8对胃癌干细胞自我更新的作用，流式细胞术检测9B8对胃癌干细胞ALDH、CD44表达的作用，免疫荧光检测HSP90在胃癌干细胞中的表达，Western blot检测胃癌干细胞中HSP90、干性相关蛋白（SOX2、OCT4）、耐药相关蛋白（TOP2A、ABCG2）、上皮-间质转化（EMT）相关蛋白（Vimentin、Snail、E-cadherin）及PI3K/AKT/mTOR信号通路相关蛋白表达。结果：胃癌干细胞中HSP90、ALDH、CD44表达高于亲本细胞，且其增殖、耐药、迁移、侵袭及自我更新能力明显强于亲本细胞（P<0.01）。HSP90功能性抗体9B8处理组与对照组相比，胃癌干细胞增殖没有差异（P>0.05），但迁移、侵袭、耐药和自我更新能力显著低于对照组（P<0.01）,ALDH、CD44表达比例明显下降（P<0.01）。HSP90功能性抗体处理组HSP90、ABCG2、TOP2A、Vimentin、Snail、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR表达下降，E-cadherin表达增加。结论：HSP90功能性抗体9B8可能通过抑制AKT/PI3K/mTOR通路活性，影响胃癌干细胞相关干性基因/蛋白、耐药基因/蛋白、EMT相关基因/蛋白表达，进而影响胃癌干细胞自我更新、耐药、侵袭、迁移等干性特征，为胃癌干细胞靶向治疗提供了新的思路。

关键词

胃癌干细胞 / 干性特征 / HSP90功能性抗体