左金丸通过抑制ERK、p38和AKT信号通路抑制肿瘤血管生成和结肠癌生长

摘要

目的：研究左金丸通过抑制ERK1/2、p38MAPK和AKT信号通路对肿瘤血管生成的影响。方法：使用不同浓度的左金丸处理含有或不含VEGF的HUVEC和Lovo细胞，利用CCK-8法评估左金丸对HUVEC和Lovo细胞增殖的影响；利用流式细胞术分析左金丸对HUVEC细胞凋亡的影响；采用划痕实验、Transwell实验、管腔形成实验检测左金丸对HUVEC细胞迁移、侵袭和管腔形成的影响；建立人结肠癌Lovo细胞裸鼠皮下移植瘤模型，随机分为5组：对照组（0.9%氯化钠溶液组），左金丸低、中、高剂量组（1 027.5 mg/kg,2 055 mg/kg,4 110 mg/kg）和化疗药5-Fu组（50 mg/kg），每隔1日给药1次。给药第21天处死裸鼠，比较各组肿瘤体积和重量。利用免疫组化法检测各组瘤体中CD34表达（微血管密度）。采用Western blot法检测左金丸对VEGFR2及其下游信号通路的调控作用。结果：左金丸能显著抑制HUVEC细胞和Lovo细胞的增殖，尤其对VEGF诱导的HUVEC细胞增殖的抑制效果更为明显（P<0.05）。左金丸能促进VEGF诱导的HUVEC细胞凋亡、抑制其迁移、侵袭和管腔形成能力（P<0.05）。在裸鼠移植瘤模型中，左金丸剂量依赖性地抑制了移植瘤的体积和重量（P<0.05），并使瘤体微血管密度显著减低（P<0.05）。此外，左金丸还通过抑制VEGF诱导的HUVEC细胞中ERK1/2、p38MAPK和AKT的磷酸化水平发挥作用，表现出剂量依赖性和时间依赖性，但未对VEGFR2磷酸化水平表达产生影响。结论：左金丸能有效抑制肿瘤血管生成，其机制可能与其抑制ERK1/2、p38MAPK和AKT信号通路有关。

关键词

左金丸 / 肿瘤血管生成 / 结肠癌 / ERK1/2 / AKT / p38MAPK