基于METTL3调控STAT1的m⁶A甲基化探讨梅花生津饮抑制巨噬细胞M1型极化的分子机制

摘要

目的：探讨梅花生津饮对METTL3介导的STAT1的m⁶A甲基化的影响，从而阐明其通过巨噬细胞极化治疗干燥综合征的分子机制。方法：采用脂多糖诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7构建体外炎症模型，并给予梅花生津饮含药血清进行干预。分别采用流式细胞术检测M1型巨噬细胞的水平，ELISA法检测细胞上清中炎症因子（IL-6、IL-23和TNF-α）的含量，Western blot和RT-qPCR法检测STAT1、METTL3和糖酵解蛋白和基因的表达，采用斑点杂交实验检测STAT1的m⁶A甲基化修饰水平。结果：与空白组相比，LPS诱导显著增加M1型巨噬细胞的比例和细胞培养液中IL-6、IL-23和TNF-α的含量，上调METTL3、STAT1、GP1、ALDOA mRNA和METTL3、STAT1蛋白的表达，差异均具有统计学意义（P<0.01）。与模型组相比，梅花生津饮能够显著降低M1型巨噬细胞的比例和细胞培养液中IL-6、IL-23和TNF-α的含量，下调METTL3、STAT1、GP1、ALDOA mRNA和METTL3、STAT1蛋白的表达，差异均具有统计学意义（P<0.05和P<0.01）。此外，与空白组相比，LPS诱导显著增加STAT1的m⁶A甲基化修饰水平，差异具有统计学意义（P<0.01）。而梅花生津饮能够显著降低巨噬细胞中m⁶A甲基化修饰水平，与模型组比较差异具有统计学意义（P<0.01）。结论：梅花生津饮抑制METTL3的表达降低STAT1的m⁶A甲基化，从而通过抑制巨噬细胞的糖酵解水平抑制其M1极化，达到抑制炎症的作用。

关键词

巨噬细胞极化 / m⁶A甲基化 / 梅花生津饮 / METTL3 / 干燥综合征