利福平通过NRF2/NQO1通路对小鼠肝细胞造成氧化损伤

摘要

目的：探究利福平（Rifampicin,RFP）调节NRF2/NQO1通路对小鼠肝细胞AML12造成的影响。方法：培养正常的小鼠肝细胞系AML12。采用不同浓度的利福平对细胞进行染毒，CCK8法检测细胞活力，根据结果选取适用于本研究的染毒浓度（50、100、200μmol/L）。采用微孔板法检测AML12细胞内过氧化氢酶（Catalase,CAT）、超氧化物歧化酶（Superoxidedismutase,SOD）活力以及丙二醛（Malondialdehyde,MDA）的含量；采用流式细胞仪检测细胞内活性氧（Reactive oxygen species,ROS）含量以及通过检测JC-1荧光探针分析线粒体内膜电位变化；采用qRT-PCR方法测定NQO1、SOD、NRF2基因的mRNA表达水平，Western Blot法检测NRF2、NQO1的蛋白表达水平。结果：随着利福平染毒浓度的升高，AML12细胞活力也随之减少。与对照组相比，利福平染毒处理组中AML12细胞的MDA含量、CAT活力、ROS水平均升高，且随着染毒浓度的增加线粒体膜电位也随之升高，且差异均具有统计学意义（P<0.05）。与对照组相比，SOD活性以及NQO1、SOD、NRF2三个基因的mRNA表达水平随利福平染毒浓度上升有所降低，且差异具有统计学意义（P<0.05）。NQO1、NRF2的蛋白表达水平随利福平染毒浓度上升降低。结论：利福平可能通过NRF2/NQO1通路调节ROS对小鼠肝细胞AML12造成氧化损伤，且具有浓度依赖性。

关键词

利福平 / AML12细胞 / 氧化损伤