结合网络药理学和体外实验探究半边旗抑制鼻咽癌的机制

摘要

目的：本文拟通过网络药理学结合体外实验探究半边旗（Pteris semipinnata L,PsL）的抗鼻咽癌作用及其机制，为后续研究提供依据。方法：根据文献获得PsL主要活性成分，在PharmMapper数据库获取PsL主要成分相关基因，并从GeneCard、OMIM、PharmGkb、TTD和CTD数据库获取鼻咽癌疾病基因。将药物与疾病的交集基因导入至String平台构建蛋白互作（PPI）网络，通过PPI网络筛选出核心靶点。结合生物信息学对核心靶点进行分析，将筛选出的核心靶点与PsL成分进行分子对接并将结合能低的对接结果进行可视化。同时进行基因本体（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析。利用PsL提取物作用于鼻咽癌Hone1细胞，采用CCK-8方法检测细胞增殖；Calcein/PI荧光染色检测细胞活性；Annexin V-FITC流式双染检测细胞凋亡，并使用Western blot检测蛋白激酶B(AKT)、磷酸化AKT(p-AKT)、非受体型酪氨酸蛋白激酶（SRC）蛋白表达的变化。结果：获得PsL与鼻咽癌交集基因共115个。其中，SRC、MAPK1以及RHOA可能是鼻咽癌治疗的关键靶点。生物信息学分析结果显示SRC在鼻咽癌中异常高表达，分子对接结果显示β-胡萝卜苷、芦丁和芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷与SRC的结合能较低。富集结果分析表明PsL可调节PI3K-AKT信号通路。体外实验结果显示半边旗水提取物可抑制鼻咽癌Hone1细胞增殖及活性，并促进Hone1细胞凋亡。半边旗水提取物可明显下调SRC和p-AKT蛋白的表达。结论：PsL可通过负向调控SRC-AKT信号通路抑制鼻咽癌细胞的增殖、促进其凋亡。

关键词

半边旗 / 鼻咽癌 / 网络药理学 / SRC-AKT信号通路