淫羊藿苷通过调控PI3K/AKT/mTOR通路影响自然衰老小鼠Treg细胞的表达

摘要

目的：观察淫羊藿苷延缓自然衰老小鼠皮肤老化的作用和初步探讨其作用机制。方法：将15月龄SPF级雄性C57BL/6J小鼠随机分为衰老组、淫羊藿苷低剂量组（5 mg/kg）和淫羊藿高剂量组（20 mg/kg），每组10只。另取10只1月龄的雄性C57BL/6J小鼠作为青年对照组。饲养3个月后处死所有小鼠。H&E染色观察小鼠皮肤组织厚度；Masson染色观察胶原纤维的变化；免疫组化检测皮肤组织Ki67和p16表达；流式细胞术检测脾脏和淋巴结中CD4⁺FoxP3⁺Treg百分比以及免疫组化检测皮肤组织Foxp3表达；蛋白免疫印迹法检测皮肤组织PI3K、AKT、m-TOR、P70S6K的蛋白表达水平。结果：与青年组比较，衰老组小鼠皮肤的厚度变薄（P<0.01）；胶原纤维含量减少（P<0.01）；表皮Ki67的表达减少（P<0.01）；皮肤组织p16的表达增加（P<0.01）；脾脏和淋巴结组织内CD4⁺Foxp3⁺Treg百分比增加（P<0.01）；皮肤组织Foxp3的表达增加（P<0.01）；皮肤组织PI3K、AKT和mTOR的蛋白表达没有明显变化，p-PI3K、p-AKT、p-mTOR和P70S6K的蛋白表达增加（P<0.01）。与衰老组小鼠比较，淫羊藿苷给药组小鼠皮肤变厚（P<0.01）；胶原纤维含量增加（P<0.01）；表皮Ki67表达增加（P<0.01）；皮肤组织p16的表达减少（P<0.01）；脾脏和淋巴结组织内CD4⁺Foxp3⁺Treg百分比减少（P<0.05,P<0.01）；皮肤组织Foxp3表达减少（P<0.01）。皮肤组织PI3K、AKT和mTOR的蛋白表达没有明显变化，p-PI3K、p-AKT、p-mTOR和P70S6K的蛋白表达减少（P<0.05,P<0.01）。结论：淫羊藿苷可以通过调控PI3K/AKT/m-TOR信号通路影响自然衰老小鼠Treg的表达进而延缓皮肤的衰老。

关键词

自然衰老 / 淫羊藿苷 / 调节性T细胞 / PI3K/AKT/mTOR