苓桂术甘汤干预高脂诱导大鼠心肌纤维化的作用机制研究

彭红艳; 张文龙; 郭露琴; 王靓

doi:10.13210/j.cnki.jhmu.20241023.002

海南医科大学学报 ›› 2025, Vol. 31 ›› Issue (16) : 1240 -1253. DOI: 10.13210/j.cnki.jhmu.20241023.002

苓桂术甘汤干预高脂诱导大鼠心肌纤维化的作用机制研究

彭红艳, 张文龙, 郭露琴, 王靓

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摘要

目的：采用网络药理学方法结合体内外实验研究苓桂术甘汤（LGZGD）干预高脂诱导心肌纤维化的作用及机制。方法：运用网络药理学方法筛选LGZGD的有效成分及靶点，获取心肌纤维化和代谢性心肌病的靶点，对共同靶点进行GO功能及KEGG通路富集分析，并建立交集靶点的PPI网络和有效成分-核心靶点关联网络。构建高脂喂养诱导的高脂血症大鼠模型，给予LGZGD干预后，采用H&E染色和Sirius red染色观察心肌损伤和胶原纤维沉积，RT-qPCR检测观察心肌组织MMP9、TGF-β、SMAD3、SMAD7mRNA表达水平，并进行免疫组化染色检测心肌组织的CollagenⅠ、CollagenⅢ表达水平；构建棕榈酸（Palmitic acid,PA）诱导的大鼠H9C2心肌损伤细胞模型，采用流式细胞术、RT-qPCR检测，探究LGZGD含药血清对凋亡水平以及MMP9、TGF-β、SMAD3、SMAD7 mRNA表达水平的影响。结果：网络药理学分析得出共筛选出LGZGD 103个活性成分和886个核心靶点，与疾病相关的核心靶点有12个，与代谢性心肌病引起的心肌纤维化密切相关的富集通路有245条等。动物实验显示，与正常组比较，模型组大鼠心肌组织出现明显的心肌细胞排列紊乱，心肌纤维部分断裂及间质纤维化等病理变化，心肌组织CollagenⅠ、CollagenⅢ含量及CollagenⅠ/CollagenⅢ比值显著升高，TGF-β、SMAD3、MMP9 mRNA表达显著升高，而SMAD7mRNA表达显著降低（P<0.05）。LGZGD干预8周后，心脏损伤有明显改善，使心肌组织CollagenⅠ、CollagenⅢ含量及CollagenⅠ/CollagenⅢ比值，TGF-β、SMAD3、MMP9 mRNA表达下调，SMAD7 mRNA表达上调（P<0.05）。细胞实验显示，与正常组比较，PA组细胞凋亡水平显著升高，且H9C2心肌细胞TGF-β、SMAD3、MMP9 mRNA表达显著升高，而SMAD7 mRNA表达显著降低（P<0.01）；与PA组比较，LGZGD干预后，H9C2心肌细胞TGF-β、SMAD3、MMP9 mRNA表达下调，SMAD7 mRNA表达上调以及细胞凋亡水平均显著改善（P<0.01）。结论：LGZGD可通过干预心肌组织TGF-β/SMAD通路，从而抑制高脂模型大鼠心肌纤维化。