姜黄素调控铁死亡干预帕金森病的网络药理学研究及实验验证

摘要

目的：基于网络药理学、分子对接及实验验证，探讨姜黄素（curcumin,Cur）调控铁死亡干预帕金森病（Parkinson's disease,PD）的可能靶标及作用机制。方法：通过Swiss Target Prediction、SEA等数据库获取Cur作用靶点。通过GeneCards数据库获取PD的治疗靶标。利用Venn在线工具获取共同作用靶点，通过Cytoscape插件获取核心靶点及核心子网络，并通过DAVID数据库进行富集分析及利用微生信平台进行可视化。通过FerrDb数据库获取铁死亡相关基因，并与Cur和PD的共同靶点进行综合探讨，对潜在治疗靶点作出预测。通过鱼藤酮构建C17.2 PD模型；CCK-8法确定Cur最佳浓度；试剂盒检测ROS、GSH、亚铁离子含量及GPx、SOD活性；RT-qPCR检测NFE2L2及NOX4基因表达情况，Western blot检测Nrf2、NOX4蛋白表达水平。结果：网络药理学预测得到NOX4、NFE2L2等17个Cur调控铁死亡抗帕金森病的可能作用靶标，并介导氧化应激相关信号通路调控铁死亡。体外实验验证，与模型组比较，2.0μmol/L Cur可降低ROS、亚铁离子含量（P<0.01），升高GSH含量（P<0.01）及GPx、SOD活性升高（P<0.05），抑制NOX4基因及蛋白表达（P<0.05）并促进Nrf2基因及蛋白表达（P<0.05）。结论：姜黄素可能通过调控Nrf2及NOX4改善鱼藤酮诱导的C17.2细胞的氧化应激及铁死亡状态，实现保护神经干细胞来改善PD的作用。

关键词

帕金森病 / 姜黄素 / 铁死亡 / 网络药理学 / Nrf2 / NOX4