基于替代分析物的LC-MS/MS检测儿童末梢血中25-羟维生素D方法建立及评价

刘菲; 宋晶晶; 曹明鹏; 祖琴琴; 周曙光; 张爱喜; 王丽; 李明

doi:10.13210/j.cnki.jhmu.20241122.001

海南医科大学学报 ›› 2025, Vol. 31 ›› Issue (15) : 1163 -1171. DOI: 10.13210/j.cnki.jhmu.20241122.001

基于替代分析物的LC-MS/MS检测儿童末梢血中25-羟维生素D方法建立及评价

刘菲, 宋晶晶, 曹明鹏, 祖琴琴, 周曙光, 张爱喜, 王丽, 李明

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摘要

目的：建立基于同位素替代分析物的液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）方法检测儿童末梢血中25-羟维生素D(25(OH)D)。方法：采用同位素标记物25(OH)D2-d6、25(OH)D3-d3作为替代分析物，25(OH)D3-d6作为内标，通过蛋白沉淀处理后，应用LC-MS/MS方法同时检测换算得到实际标本中25(OH)D2和25(OH)D3的含量。评价该方法的相同浓度下响应值等效性、特异性、线性、检出限（LOD）、定量限（LOQ）、准确度、精密度、基质效应、携带污染和实际样品加标回收率。结果：25(OH)D2和25(OH)D3的响应因子分别为1.46和1.04；线性相关系数均>0.995,LOD分别为0.16和0.33 ng/mL,LOQ分别为0.5和1ng/mL，替代分析物25(OH)D2-d6和25(OH)D3-d3相对回收率在96.05%～107.07%范围内，批内批间精密度均<10%，基质因子在0.882～1.121，无明显携带污染，样品可室温避光放置24 h,2～8℃下保存7 d。结论：建立了基于替代分析物的LC-MS/MS定量测定儿童末梢血中25(OH)D2和25(OH)D3的方法，该方法简单易行、结果可靠，有望成为儿童或其他采血困难人群的候选方法。