雷藤舒通过p53/SLC7A11/GPX4信号通路调控铁死亡在类风湿关节炎小鼠模型中的治疗作用及其分子机制研究

摘要

目的：观察雷藤舒对类风湿关节炎小鼠铁死亡的影响及治疗作用，并基于肿瘤蛋白53(p53)/溶质载体家族7成员11(SLC7A11)/谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)通路探究其可能机制。方法：将40只雄性DBA小鼠，分为Control组、Model组、雷藤舒（LLDT-8）组（0.5 mg/kg）和铁死亡抑制剂（Fer-1）组（1 mg/kg），每组10只。除Control组外，采用Ⅱ型胶原诱导法制备类风湿关节炎（CIA）模型。造模成功后，各给药组进行相应药物干预，Control组和Model组灌胃等体积生理盐水，干预周期为4周。主要观察指标包括：小鼠足趾厚度及关节炎临床评分；微计算机断层扫描评估骨破坏；苏木素-伊红染色和番红O-固绿染色法评估关节组织病理学变化；酶联免疫吸附测定法检测血清中MMP-3、TNF-α、IL-1β和IL-6；比色法检测关节组织中MDA、GSH和NADPH含量；免疫荧光检测关节组织中的ROS；免疫组化法及实时荧光定量PCR检测SLC7A11、GPX4、p53蛋白及mRNA表达。结果：与Control组比较，Model组小鼠关节红肿畸形，关节炎临床评分明显升高，关节组织骨破坏、滑膜增生及炎性细胞浸润，血清MMP-3、TNF-α、IL-1β、IL-6水平明显上升；关节组织GSH、NADPH水平明显升高，ROS、MDA含量明显降低；SLC7A11、GPX4蛋白及mRNA表达均明显上调，p53蛋白及mRNA表达下调，组间差异均有统计学意义（P<0.05）。与Model组比较，LLDT-8组可显著改善小鼠关节肿胀变形，降低关节炎临床积分，减轻小鼠关节骨破坏以及减少炎症细胞浸润和滑膜增生，血清MMP-3、TNF-α、IL-1β、IL-6表达水平明显降低，关节组织GSH、NADPH水平明显降低，ROS、MDA含量明显升高，SLC7A11、GPX4蛋白及mRNA表达均明显下调，p53蛋白及mRNA表达上调，组间差异均有统计学意义（P<0.05）。结论：雷藤舒可有效减轻CIA小鼠滑膜增生及炎性浸润，缓解关节组织病理损伤，其机制或与调控p53/SLC7A11/GPX4信号通路，增加铁死亡敏感性有关。

关键词

类风湿关节炎 / 铁死亡 / 雷藤舒 / 炎症