敲低NSD2对三阴性乳腺癌细胞基因表达谱及紫杉醇化疗敏感性的影响研究

陈艳; 赵金辉; 胡诗涵; 王禹; 潘云; 高波

doi:10.13210/j.cnki.jhmu.20241212.002

海南医科大学学报 ›› 2025, Vol. 31 ›› Issue (21) : 1639 -1651. DOI: 10.13210/j.cnki.jhmu.20241212.002

敲低NSD2对三阴性乳腺癌细胞基因表达谱及紫杉醇化疗敏感性的影响研究

陈艳, 赵金辉, 胡诗涵, 王禹, 潘云, 高波

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摘要

目的：探究敲低NSD2基因对三阴性乳腺癌（triple negative breast cancer,TNBC）细胞基因表达谱及紫杉醇（paclitaxel,PTX）化疗敏感性的影响。方法：利用慢病毒shRNA载体介导敲低MDA-MB-231细胞中NSD2基因，使用基因表达谱芯片筛选差异表达基因，进行聚类分析、GO和KEGG富集分析。采用Realtime PCR和Western blot检测NSD2的mRNA及蛋白表达水平，在PTX作用条件下，Hoechst染色观察细胞的凋亡形态特征，Annexin V-FITC/PI法检测细胞的凋亡率，Western blot检测程序性细胞死亡通路相关差异基因的蛋白表达水平。利用TIMER2.0、UALCAN和Kaplan-Meier Plotter数据库分析乳腺癌组织、TNBC组织和正常乳腺组织中NSD2、程序性细胞死亡通路相关差异基因的表达以及在接受过化疗的TNBC患者中的预后评估价值。结果：基因芯片共筛选483个差异基因，包括324个上调基因和159个下调基因（P<0.01）;GO和KEGG富集分析发现差异表达基因与坏死性凋亡、凋亡等程序性细胞死亡信号通路显著相关（P<0.05）。敲低NSD2基因显著增加PTX作用下MDA-MB-231细胞的凋亡率，程序性细胞死亡相关蛋白TNFSF10、TNFRSF10B、FAS、CASP1以及Cleaved PARP1表达也明显增强（P<0.05）。与正常乳腺组织相比，乳腺癌和TNBC中NSD2和PARP1表达显著上调，而TNFSF10、FAS、CASP1表达均显著下调（P<0.001）；接受过化疗的TNBC患者中，NSD2高表达患者无复发生存率低于低表达患者，而TNFRSF10B、FAS、CASP1高表达患者预后优于低表达患者（P<0.05）。结论：敲低NSD2改变TNBC细胞的基因表达谱，并通过诱导程序性死亡增强细胞对PTX化疗的敏感性，为寻找TNBC化疗耐药的分子靶标提供了新的见解。