基于NEK7/NLRP3/ASC信号通路探讨平喘宁方抑制细胞焦亡调控哮喘大鼠气道炎症的机制

刘家鑫; 方文凯; 袁亚美; 叶卫东; 李秋慧; 方向明

doi:10.13210/j.cnki.jhmu.20241219.002

海南医科大学学报 ›› 2025, Vol. 31 ›› Issue (23) : 1802 -1811. DOI: 10.13210/j.cnki.jhmu.20241219.002

基于NEK7/NLRP3/ASC信号通路探讨平喘宁方抑制细胞焦亡调控哮喘大鼠气道炎症的机制

刘家鑫, 方文凯, 袁亚美, 叶卫东, 李秋慧, 方向明

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摘要

目的：从细胞焦亡角度探讨由经典名方组合而成的平喘宁方、MCC950抑制剂对哮喘大鼠气道炎症的影响及作用机制。方法：70只SD大鼠随机分为7组：空白组、模型组、平喘宁组、MCC950抑制剂组、平喘宁+MCC950抑制剂组、地塞米松组、桂龙咳喘宁组。10%鸡卵清蛋白（OVA）经腹腔及四肢皮下注射致敏，用2%OVA雾化联合寒冷空气（2～4℃）刺激，激发哮喘大鼠模型。平喘宁（7.289 g/kg）、MCC950(10 mg/kg)、平喘宁（7.289 g/kg）+MCC950(10 mg/kg)、地塞米松（0.405 mg/kg）、桂龙咳喘宁（0.405 g/kg）灌胃及雾化，持续干预3周。末次激发后，对大鼠肺组织进行H&E、PAS染色，观察大鼠气道炎症和细胞增殖情况。采用ELISA检测血清和BALF中IL-1β、IL-18、IL-6的含量，RT-PCR检测NEK7、NLRP3、ASC、Caspase-1的mRNA表达水平，Western blot检测NEK7、NLRP3、ASC、Caspase-1的蛋白表达水平。结果：与空白组比较，模型组大鼠饮食减少、体重下降、情绪烦躁、呼吸喘促，气道炎性细胞浸润、杯状细胞增生，血清和BALF中IL-1β、IL-18、IL-6炎症因子明显增多；NEK7、NLRP3、ASC、Caspase-1的mRNA和蛋白表达水平升高。与模型组比，平喘宁、MCC950抑制剂、平喘宁+MCC950抑制剂组大鼠饮食逐渐改善、喘促缓解，气道炎性细胞浸润明显减少，血清和BALF中IL-1β、IL-18、IL-6炎症因子降低（P<0.001），同时抑制了NEK7、NLRP3、ASC、Caspase-1的mRNA和蛋白的表达（P<0.001）。结论：平喘宁和MCC950抑制剂可以明显改善OVA联合寒冷刺激诱发的哮喘大鼠气道炎症，且与NEK7/NLRP3/ASC信号通路和细胞焦亡相关，其中平喘宁联合MCC950抑制剂的疗效更加明显，提示联合治疗的效果要优于单一复方或西药。