血塞通软胶囊对东莨菪碱致阿尔茨海默病模型小鼠学习记忆能力及突触可塑性的影响研究

摘要

目的：探究血塞通软胶囊（Xuesaitong soft capsule,XST）对东莨菪碱所致阿尔茨海默病模型小鼠学习记忆能力的影响及突触可塑性的调节作用。方法：90只雄性昆明小鼠随机分为空白（Control）组，模型（Model）组，盐酸多奈哌齐（DPH）组及血塞通低、中、高剂量（XST-L、XST-M、XST-H）组。通过腹腔注射东莨菪碱制备阿尔茨海默病模型，使用Morris水迷宫检测小鼠空间认知记忆功能改变；H&E染色观测小鼠海马CA1区和皮质区细胞形态改变；透射电镜观察海马超微结构变化；ELISA测定脑组织中环磷酸腺苷（cAMP）含量变化，免疫组化染色检测突触素（SYN）、生长相关蛋白-43(GAP-43)、突触后致密物-95(PSD-95)蛋白水平表达；Western blot检测PSD-95、GAP-43、SYN、环磷酸腺苷反应元件结合蛋白（CREB）、蛋白激酶A(PKA)在海马和皮质区的表达。结果：Morris水迷宫结果显示，与Control组比较，Model组小鼠平均逃避潜伏时间明显延长，穿越平台次数出现减少（P<0.05），游泳轨迹冗长杂乱。与Model组相比，经XST治疗后小鼠平均逃避潜伏期明显缩短，穿越平台次数增加（P<0.05），探寻轨迹简短清晰。H&E染色结果显示，Model组细胞层变薄，神经元排列松散紊乱，部分细胞胞膜破裂，细胞核深染，染色质裂解，突起不同程度消失。与Model组比较，各用药组上述病理变化得到不同程度改善。透射电镜观察结果显示，Model组突触结构不完整，突触间隙模糊，突触小泡以及突触前致密物质减少，药物干预后突触结构相对完整，突触间隙清晰，突触小泡密度增加，线粒体丰富，突触前致密物增多，突触后膜增厚。ELISA结果显示，与Control组比较，Model组cAMP蛋白表达明显减少（P<0.01）；与Model组比较，海马区DPH组和XST-H组cAMP含量明显增加（P<0.05），皮质区DPH组、XST-M组和XST-H组cAMP含量明显升高（P<0.05）。免疫组化结果显示，与Control组比较，Model组SYN、GAP-43、PSD-95蛋白表达均呈明显下降趋势（P<0.01）。与Model组相比，其余各组以上蛋白表达均有不同程度的增加（P<0.05）。Western Blot结果显示，与Control组比较，Model组PSD-95、GAP-43、CREB、PKA和SYN蛋白表达明显减少（P<0.05）；与Model组比较，药物干预后PSD-95、GAP-43、CREB、PKA和SYN表达水平不同程度增加（P<0.05）。结论：XST能够改善阿尔兹海默病模型小鼠学习记忆能力，其作用机制可能与激活cAMP/PKA/CREB信号通路、修复突触可塑性相关。

关键词

血塞通软胶囊 / 阿尔茨海默病 / 突触可塑性 / 学习记忆能力