益肺通络方对肺纤维化模型大鼠IL-17RA/TRAF6/ACT1信号通路及肝肾功能影响的研究

摘要

目的：通过博来霉素气管滴入法构建肺纤维化动物模型，探讨益肺通络方对模型大鼠IL-17RA/TRAF6/ACT1信号通路及肝肾功能的影响。方法：采用博来霉素气管滴入法构建SD大鼠肺纤维化模型，随机分为5组：空白对照组、模型组、强的松组、益肺通络方低剂量组和益肺通络方高剂量组，分别给予对应的干预，共干预14 d，取大鼠血清和肺组织做检测。通过聚合酶链式反应（polymerase chain reaction, PCR）检测IL-17RA、TRAF6、ACT1、IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA相对表达，通过蛋白质印迹（Western blot, WB）检测IL-17RA、TRAF6、ACT1蛋白表达，通过免疫荧光检测信号分子TRAF6和ACT1表达，通过酶联免疫吸附测定法（enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA）检测大鼠血清细胞因子IL-1β和TNF-α含量，采用全自动生化分析仪检测大鼠的肝肾功能指标。结果：免疫荧光图像显示与空白对照组相比，模型组大鼠肺组织信号分子TRAF6、ACT1的荧光强度较高，在益肺通络方干预后荧光强度显著降低。PCR结果显示与空白对照组相比，模型组大鼠显著上调IL-17RA、TRAF6、ACT1、IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA相对表达（P<0.05）；与模型组相比，益肺通络方组大鼠上述基因相对表达均明显减少（P<0.05）。WB检测结果显示与空白对照组相比，模型组大鼠肺组织IL-17RA、TRAF6、ACT1蛋白表达明显升高（P<0.05）；与模型组相比，益肺通络方可显著抑制上述蛋白表达（P<0.05）。ELISA显示与空白对照组相比，模型组大鼠细胞因子IL-1β、TNF-α含量明显升高（P<0.05）；与模型组相比，益肺通络方组大鼠上述细胞因子含量均明显降低（P<0.05）。全自动生化分析仪结果显示大鼠肝肾功能相关指标均在正常范围内，各组间无统计学差异（P>0.05）。结论：益肺通络方可能通过调控IL-17RA/TRAF6/ACT1信号通路发挥抗肺纤维化作用。益肺通络方通过下调IL-17A相关细胞因子分泌发挥抗炎作用。益肺通络方对肝肾功能无毒副作用。

关键词

肺纤维化 / 益肺通络方 / IL-17A / 实验研究