基于敌百虫促进DNMT3A表达致空间学习记忆能力下降及海马神经元细胞凋亡

摘要

目的：探讨敌百虫暴露对大鼠空间学习记忆能力和神经元细胞的影响，为敌百虫神经毒性的机制研究提供参考。方法：基于前期研究，分别以PBS缓冲液或以10 mg/kg剂量敌百虫灌胃SD大鼠30 d，利用水迷宫实验评估大鼠学习记忆能力，H&E染色观察海马组织神经元形态，免疫组织化学染色检测5?甲基胞嘧啶（5?mc）,TUNEL染色观察细胞凋亡，Western blot检测DNMT3A及凋亡相关基因表达；以0、160、200、240μmol/L浓度处理HT?22小鼠海马神经元细胞48 h,Western blot检测DNMT3A及凋亡相关基因表达，流式细胞术检测细胞凋亡；HT?22细胞敲低DNMT3A后200μmol/L敌百虫干预48 h,Western blot检测DNMT3A及凋亡相关基因表达。结果：敌百虫干预后，水迷宫实验结果显示大鼠学习记忆能力降低（P<0.05）,H&E染色结果显示海马组织形态学无明显变化，免疫组织化学染色显示海马组织5?mc水平增高（P<0.05）;Western blot结果显示，敌百虫处理后DNMT3A表达上升（P<0.05），凋亡相关基因表达改变（P<0.05），流式细胞术显示细胞凋亡率增加（P<0.05），但敲低DNMT3A可部分逆转敌百虫诱导的细胞凋亡（P<0.05）。结论：敌百虫持续暴露导致大鼠认知功能下降，可能与DNMT3A表达升高及DNA甲基化水平升高导致的细胞凋亡有关。

关键词

敌百虫 / 有机磷中毒 / 空间学习记忆 / DNA甲基化 / DNMT3A / 细胞凋亡