基于网络药理学和实验验证探究牛耳枫-辣蓼抗胃黏膜损伤作用及机制

摘要

目的：探究牛耳枫?辣蓼（Daphniphyllum calycinum-Polygonum hydropiper, DCPH）对胃黏膜损伤的保护作用及机制。方法：网络药理学获取DCPH干预胃黏膜损伤的活性成分及主要靶点，构建PPI网络，进行GO和KEGG富集分析筛选可能涉及的生物过程和信号通路。利用乙醇刺激GES?1细胞构建胃黏膜损伤的体外模型，通过检测细胞活力、活性氧（ROS）含量、TNF-α和IL-1β表达、线粒体膜电位水平以及TLR4和NF?κB蛋白表达，验证DCPH对胃黏膜损伤的保护作用及机制。结果：通过网络药理学筛选出DCPH干预胃黏膜损伤的潜在活性成分44种，核心靶点TNF、BCL2、EGFR、TLR4等29个，涉及PI3K?Akt、HIF?1、NF?κB和ROS等多个生物过程和信号通路。体外实验结果显示，与正常组相比，乙醇能明显抑制GES?1细胞活力（P<0.001）、提高ROS含量（P<0.001）、诱导炎性因子TNF-α和IL-1βmRNA表达（P<0.001），明显降低细胞内线粒体膜电位，并明显上调TLR4和NF?κB蛋白表达（P<0.01）。与模型组比较，DCPH明显提高乙醇诱导的GES?1细胞活力（P<0.05），改善细胞形态，同时降低细胞内ROS水平（P<0.05）、抑制TNF-α和IL-1β表达（P<0.05）、恢复线粒体膜电位水平，明显抑制TLR4和NF?κB蛋白表达（P<0.05）。结论：DCPH通过下调TLR4/NF?κB信号通路表达，降低细胞ROS含量和抑制炎症因子表达，恢复细胞线粒体膜电位水平，减轻GES?1细胞损伤，从而发挥抗胃黏膜损伤作用。

关键词

牛耳枫?辣蓼 / 胃黏膜损伤 / GES?1细胞 / 网络药理学 / TLR4/NF?κB