基于Nrf2/SLC7A11/GPX4通路调控铁死亡探讨黄连厚朴汤对溃疡性结肠炎模型小鼠的影响

摘要

目的：基于核因子E2相关性因子2(Nrf2)/胱氨酸/谷氨酸逆向转运蛋白溶质载体家族7成员11(SLC7A11)/谷胱甘肽过氧化酶4(GPX4)通路观察黄连厚朴汤（Huanglian Houpo Decoction,HLHPD）对溃疡性结肠炎（UC）模型小鼠的影响，并探讨其可能的作用机制。方法：将60只小鼠随机分为6组：空白对照组、葡聚糖硫酸钠盐（DSS）模型组、西药柳氮磺吡啶组（西药组）以及黄连厚朴汤低（HLHPD-L组）、中（HLHPD-M组）、高（HLHPD-H组）剂量组，每组10只，除空白组外，采用DSS建立UC模型。造模成功后，除空白组和模型组灌胃等体积蒸馏水外，HLHPD-L组、HLHPD-M组、HLHPD-H组及西药组分别给予相应剂量黄连厚朴汤和柳氮磺吡啶（4 g/kg）药液灌胃，每天1次，连续给药14 d。观察小鼠一般情况、疾病活动指数；酶联免疫吸附实验检测各组小鼠血清白细胞介素IL-6、IL-1β及肿瘤坏死因子TNF-α含量；试剂盒检测结肠组织中MDA、SOD、GSH的含量；通过H&E染色观察各组小鼠结肠组织病理变化；透射电子显微镜观察小鼠结肠组织超微结构；采用Western Blot检测小鼠结肠组织Nrf2、SLC7A11、GPX4蛋白表达情况。结果：与空白对照组比较，DSS组小鼠疾病活动指数评分，血清中促炎症细胞因子IL-6、IL-1β和TNF-α的表达水平，以及结肠组织中MDA水平显著上调，SOD、GSH水平明显降低（P<0.01）；各药物干预组上述炎症因子水平较DSS组降低（P<0.01）,HLHPD中剂量组和高剂量组组织中MDA水平降低（P<0.01）,SOD和GSH水平升高（P<0.05）;H&E染色结果显示，HLHPD可有效改善组织病理学损伤，减少组织坏死深度和范围；透射电镜结果显示，HLHPD各组肠黏膜、微绒毛及桥粒结构，以及肠上皮细胞间连接明显恢复；Western blot结果显示，DSS组小鼠结肠组织中Nrf2、GPX4、SLC7A11蛋白表达较空白对照组显著降低（P<0.01）；与DSS组比较，给黄连厚朴汤后，各剂量组Nrf2、GPX4、SLC7A11蛋白表达显著升高（P<0.01）。结论：HLHPD可有效改善UC的炎症损伤，其作用机制可能与调控Nrf2/SLC7A11/GPX4通路介导的铁死亡有关。

关键词

黄连厚朴汤 / 溃疡性结肠炎 / 铁死亡 / Nrf2/SLC7A11/GPX4信号通路