基于代谢组学分析安神定志方抑制神经炎症治疗阿尔茨海默病的机制研究

摘要

目的：本研究通过观察安神定志方对阿尔茨海默病（AD）大鼠血清代谢组学的影响，并通过细胞进一步明确安神定志方抑制神经炎症治疗AD的分子机制。方法：30只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和安神定志方组，通过Aβ1-42侧脑室注射制备大鼠模型并给予相应药物干预4周。通过H&E染色、尼氏染色、免疫组化和免疫荧光染色观察安神定志方对海马组织神经元凋亡和老年斑的影响。同时，采用非靶向代谢组学技术，通过主成分分析、正交偏最小二乘法判别分析和差异代谢筛选明确安神定志方对血清代谢物的影响。在此基础上，小鼠小胶质细胞BV2分为空白组、脂多糖组、安神定志方组和二氢山柰酚组，除空白组外，均采用脂多糖诱导建立神经炎症细胞模型并给予安神定志方含药血清和二氢山柰酚进行干预，采用ELISA和RT-qPCR法检测安神定志方和二氢山柰酚对BV2细胞炎症因子、脑源性神经营养因子（BDNF）和血管内皮生长因子（VEGF）表达水平的影响；随后将上述BV2与Neuro-2a细胞系共培养，采用CCK8、免疫荧光检测安神定志方和二氢山柰酚对Neuro-2a细胞活性与凋亡的影响。结果：动物实验结果显示，与模型组相比，安神定志方能够显著改善海马CA1区病理形态，恢复海马CA1区尼氏小体数量，抑制老年斑的形成和细胞凋亡，差异具有统计学意义（P<0.01）。代谢组学结果显示，假手术组和模型组的差异代谢物共813个，安神定志方组和模型组间的差异代谢物共774个，通过交集后得到378个关键差异代谢物。细胞实验结果显示，相较于脂多糖组，安神定志方和二氢山柰酚均能显著抑制BV2细胞炎症因子TNF-α、IL-1β与IL-6的含量，上调BDNF和VEGF mRNA的表达，差异均具有统计学意义（P<0.01）；此外，安神定志方和二氢山柰酚均能显著改善Neuro-2a的细胞活性和抑制细胞凋亡（P<0.01）。结论：安神定志方能够通过增加血清中二氢山柰酚的水平，从而达到抑制神经炎症改善神经元凋亡治疗AD的作用。

关键词

安神定志方 / 阿尔茨海默病 / 代谢组学 / 神经炎症 / 二氢山柰酚