ANXA2通过抑制自死亡从而改善心肌细胞缺氧/复氧损伤的实验研究

摘要

目的：自死亡作为一种自噬依赖性细胞死亡形式，在心肌缺血再灌注损伤（myocardial ischemia reperfusion injury,MIRI）中发挥“促生存”和“促死亡”的矛盾作用。基于自死亡途径，本研究旨在探讨膜联蛋白A2(annexin A2,ANXA2)对MIRI的影响及机制。方法：使用心肌细胞缺氧再复氧（hypoxia/reoxygenation,H/R）损伤模型模拟MIRI，构建靶向干预ANXA2的shRNA(shANXA2)，采用CCK-8法检测细胞活力，通过共聚焦显微镜观察自噬小体、自噬溶酶体比例，使用Western blot检测自死亡相关蛋白表达。结果：ANXA2在心肌细胞H/R损伤后表达明显升高，下调ANXA2表达后转录因子EB(transcription factor EB,TFEB)核内表达增加，自噬小体比例降低，溶酶体比例升高，细胞活力恢复。Western blot结果显示，下调ANXA2可降低ANXA2、p62和LC3Ⅱ的蛋白水平，上调TFEB核内表达。结论：ANXA2通过抑制TFEB的表达和核易位，影响自噬通量和自死亡发生，加剧心肌细胞H/R损伤。下调ANXA2可促进自噬通量，减少自死亡发生，从而减轻MIRI。本研究为ANXA2作为治疗MIRI的潜在靶点提供了实验依据。

关键词

自死亡 / 心肌缺血再灌注损伤 / 膜联蛋白A2(ANXA2) / 转录因子EB(TFEB) / 自噬通量