同型半胱氨酸干扰滋养细胞线粒体并影响细胞融合功能

王议平; 李铭洋; 蔡忠宇; 李瑞霞; 魏晓星

doi:10.13210/j.cnki.jhmu.20250520.002

海南医科大学学报 ›› 2026, Vol. 32 ›› Issue (08) : 570 -578. DOI: 10.13210/j.cnki.jhmu.20250520.002

同型半胱氨酸干扰滋养细胞线粒体并影响细胞融合功能

王议平, 李铭洋, 蔡忠宇, 李瑞霞, 魏晓星

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摘要

目的：探讨同型半胱氨酸（homocysteine,Hcy）对滋养细胞融合过程的影响及潜在机制。方法：在体外用Bewo细胞模拟体内滋养细胞进行培养，利用毛喉素（forskolin,FSK）成功构建细胞融合模型，并使用50µmol/L Hcy处理细胞48 h。运用共聚焦显微镜观察融合情况并计算融合指数；通过ELISA检测人绒毛膜促性腺激素（human chorionic gonadotropin,hCG）含量；通过qPCR技术检测融合基因ERVW‑1、ERVFRD‑1、GCM1、CGB的mRNA表达水平，及与线粒体功能和氧化应激相关基因的mRNA表达情况；通过Western blot测定ERVW-1、ERVFRD-1、GCM1的蛋白表达水平；通过免疫荧光检测细胞活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平和膜电位变化；使用化学发光测定ATP水平；采用WST检测超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）的活性。结果：滋养细胞在FSK诱导下成功融合，加入Hcy后，细胞出现明显变化：细胞融合指数明显降低（P<0.001）,hCG分泌浓度大幅减少（P<0.001），细胞融合相关的基因和蛋白表达水平明显降低（P<0.05）；线粒体膜电位下降（P<0.001）,ATP水平明显减少（P<0.01），线粒体融合相关基因表达量明显降低（P<0.001），而线粒体分裂基因的表达量明显升高（P<0.05）；细胞内ROS生成量明显增加（P<0.01）,T-SOD活性明显降低（P<0.001），氧化应激关键调控基因NRF2 mRNA表达水平明显降低（P<0.001）。结论：Hcy可能通过干扰线粒体正常功能，促使ROS大量生成，引发氧化应激反应，阻碍滋养细胞的正常融合与hCG分泌，对胎盘发育和妊娠健康产生负面影响。