基于Th17/Treg免疫平衡探讨艾灸对缺血性脑卒中大鼠脑肠共治机制研究

摘要

目的：观察艾灸干预对缺血性脑卒中大鼠Th17/Treg细胞的影响，从免疫平衡角度探讨其通过“脑肠共治”改善神经功能的作用机制。方法：120只雄性SD大鼠随机分为空白组（25只）、造模组（95只）。75只大脑中动脉闭塞（middle cerebral artery occlusion,MCAO）造模成功大鼠随机分为模型组、益生菌组和艾灸组，每组25只。益生菌组给予金双歧灌胃，艾灸组给予悬灸“百会”“大椎”及双侧“天枢”“足三里”穴，每次20 min，两组每日干预1次，连续7 d。干预结束后，采用Longa评分、TTC染色、H&E染色、ELISA、实时荧光定量PCR、Western blot、免疫组织化学及流式细胞术检测艾灸对MCAO大鼠的影响。结果：与空白组相比，模型组Longa评分升高（P<0.01），脑梗死体积增大（P<0.01），缺血侧脑、结肠组织形态破坏且炎性细胞浸润明显，白细胞介素-10（interleukin-10,IL-10）含量减少（P<0.01）,IL-10和叉头框蛋白P3（forkhead box P3,FOXP3）mRNA、蛋白表达水平及阳性表达降低（P<0.01），白细胞介素-17A（interleukin-17A,IL-17A）含量增加（P<0.01）,IL-17A和维甲酸相关孤核受体γt（retinoid-related orphan nuclear receptor γt,RORγt） mRNA、蛋白表达水平及阳性表达升高（P<0.01）,CD4⁺、Treg百分比降低（P<0.05）,CD8⁺、Th17百分比升高（P<0.05）。与模型组相比，益生菌组和艾灸组Longa评分降低（P<0.01），脑梗死体积缩小（P<0.01），缺血侧脑、结肠组织形态相对完好，炎性细胞浸润减轻，IL-10含量增加（P<0.01）,IL-10和FOXP3 mRNA、蛋白表达水平及阳性表达升高（P<0.01）,IL-17A含量减少（P<0.01）,IL-17A和RORγt mRNA、蛋白表达水平及阳性表达降低（P<0.01）,CD4⁺、Treg百分比升高（P<0.05）,CD8⁺、Th17百分比降低（P<0.05）。结论：艾灸通过脑肠共治改善缺血性脑卒中后神经功能损伤，可能与调节Th17/Treg免疫平衡，抑制脑肠炎性反应有关。

关键词

艾灸 / 缺血性脑卒中 / 脑肠共治 / Th17/Treg免疫平衡