非肌肉肌球蛋白ⅡA维持高糖诱导的脑微血管内皮细胞功能

摘要

目的：探讨非肌肉肌球蛋白ⅡA(non-muscle myosinⅡA, NMⅡA)在高糖（high glucose,HG）诱导的脑微血管内皮细胞损伤中的作用机制。方法：采用高糖培养基培养小鼠脑微血管内皮细胞bEnd.3，建立体外糖尿病脑血管病变模型。利用siRNA技术敲低NMⅡA表达，检测细胞活力、炎症因子、氧化应激产物水平及细胞表征改变。通过CCK-8法、细胞划痕实验、原子力显微镜检测等方法，检测细胞增殖、迁移、侵袭及力学特性变化。通过Western blot和RT-qPCR检测相关蛋白及基因表达。结果：成功构建bEnd.3高糖模型。敲低NMⅡA后，炎症因子和氧化应激产物水平明显升高，细胞活力和迁移能力降低，细胞高度、表面黏附力和杨氏模量降低（P<0.05）。结论：NMⅡA参与细胞收缩、迁移、胞质分裂及维持细胞张力等关键过程。在高糖环境下，敲低NMⅡA会造成炎症因子等指标加重，细胞功能活力减弱（P<0.05）。说明NMⅡA或是维持高糖状态下脑微血管内皮细胞正常功能的关键因素之一，可能为治疗糖尿病脑血管病变寻找到新的潜在靶点。

关键词

糖尿病 / 脑微血管内皮细胞 / 非肌肉肌球蛋白ⅡA(NMⅡA) / 高糖 / 细胞损伤