光蜥(
Ateuchosaurus chinensis Gray,1845)隶属有鳞目(Squamata)蜥蜴亚目(Lacertilia)石龙子科(Scincidae)光蜥属(
Ateuchosaurus),于1845年由英国自然学家约翰·爱德华·格雷(John Edward Gray)命名。光蜥属世界记录报道仅3种,即分布于日本大隅群岛至奄美群岛的琉球光蜥(
A.pellopleurus Hallowell,1861)、日本冲绳群岛的冲绳光蜥(
A.okinavensis,Thompson,1912)和越南北部和中国东南部的光蜥
[1-2]。光蜥在中国主要分布于东南部的多个省份,包括福建、江西、广东、海南、广西、贵州、香港和澳门等地
[3-5]。2024年11月4日,在浙江泰顺采集到1号光蜥属标本,标本经外部形态特征对比及分子系统发育关系分析,鉴定为光蜥,系浙江省爬行动物新纪录种。本研究描述了该物种形态特征、分子数据和系统发育分析及采集地生境,为对该物种后续深入的研究提供了基础资料,并为石龙子科物种的系统学和谱系地理学研究提供了重要数据。
1 材料与方法
1.1 试验材料
2024年11月4日,于浙江省温州市泰顺县左溪村(27°38′50″N,119°47′02″E)进行两栖爬行动物多样性调查时采集到1号光蜥属活体标本,对其进行形态测量与分子鉴定。取标本少量肌肉组织浸没在95%乙醇中用作DNA提取,固定后的标本保存于75%乙醇中,存放在温州大学生命与环境科学学院动物标本馆,标本号为WZUre2024110401。本研究通过了温州大学实验动物管理委员会的审查(批件号:WZU-2024-113)
1.2 形态测量与鉴定
使用ABS Digimatic数显游标卡尺(日本Mitutoyo,量程0~200 mm,精度0.01 mm)测量标本的头体长、头长和头宽等22项形态指标,以《中国动物志 爬行纲 第2卷 有鳞目 蜥蜴亚目》的分类体系为基础
[6],结合Makino
et al.
[2]对该属形态特征的详细描述进行形态鉴定。各项测量标准如下:头体长(snout-vent length,SVL,由吻端至泄殖肛孔前缘的长度)、头长(head length,HL,由吻端至顶间骨后缘的长度)、头宽(head width,HW,头部最宽处的直线长度)、头高(head height,HH,头部最高处的直线长度)、吻眼长(snout-eye length,SeyL,从吻尖到眼前角的长度)、眼长(eye length,EyL,眼前后角之间的长度)、眼耳长(eye-ear length,EyEaL,从眼后角到耳孔前缘的长度)、耳孔直径(ear diameter,EaD,水平测量耳孔直径的长度)、吻腋长(snout-axilla length,SAL,从吻端至前肢与体壁后缘连接处的长度)、腋腹股沟长(axilla to groin length,AGL,四肢与身体成直角时,从前肢与体壁后缘连接处至后肢与体壁后缘连接处的长度)、前肢长[fore-limb length,FLL,四肢与身体成直角时,从前肢与体壁后缘连接处至第Ⅲ指尖端(不包括爪)的长度]、后肢长[hind-limb length,HLL,后肢与身体成直角时,从后肢与体壁后缘连接处至第Ⅳ趾尖端(不包括爪)的长度]和尾长(tail length,TaL,由泄殖肛孔前缘至尾尖的长度)。
统计鳞片长度:额鳞长(额鳞,frontal,位于左右眶背之间的单枚大鳞片,一般呈五边形或六边形)、额顶鳞长(额顶鳞,frontoparietals,介于额鳞与顶鳞之间的成对鳞片)、顶鳞长(顶鳞,parietals,额顶麟之后,顶间麟两侧的鳞片,是头背最大的一对鳞片)、顶间鳞长(顶间鳞,interparietal,位于额顶鳞后正中的一枚鳞片,顶眼即位于顶间鳞之上,呈一小白点)和外顶鳞长(外顶鳞,ectoparietals,顶鳞和上颞骨包围的鳞片)。统计鳞片数量:上唇鳞(supralabials,上颌口缘除吻鳞以外的所有鳞片)、下唇鳞(infralabials,下颌口缘除颏鳞之外的所有鳞片)、环体中段鳞行(scale rows in the center of the body,环绕前后肢间身体中部自腹至背再回到背部起始处一周的鳞片行数)和第Ⅳ趾趾下瓣(subdigital lamellae under the forth toe,第Ⅳ趾趾腹面的鳞片)。
1.3 分子鉴定
1.3.1 COI基因序列的获得
在形态测量后,先剪取标本的尾部肌肉组织25 mg用于系统发育分析,随后对标本进行乙醇溶液固定。使用Ezup柱式动物基因组DNA抽提试剂盒[生工生物工程(上海)股份有限公司]提取总DNA,采用生工生物工程(上海)股份有限公司合成的
COI基因引物REPTBCf(5'-TCAACAAACCAYAAAGAYATYG G-3')和REPTBCr(5'-TAAACTTCAGGGTGGCCRAA RAATCA-3')
[7]在PCR仪(Bio-Rad,美国)中对提取的DNA进行聚合酶链式反应(PCR)扩增。PCR反应程序:95 ℃预变性5 min;95 ℃变性30 s,46~56 ℃退火30 s,72 ℃延伸1 min,35个循环;72 ℃终延伸10 min,4 ℃保存。扩增产物通过1%琼脂糖凝胶电泳检测,以确认扩增效果,随后将样品送至生工生物工程(上海)股份有限公司进行双向测序。测序成功的
COI基因序列在NCBI上进行BLAST比对,以验证其是否为目标基因。最后,在MEGA11.0软件中按照脊椎动物线粒体密码子进行转换,以排除假基因污染。
1.3.2 遗传距离的计算和系统发育树的构建
在MEGA11.0软件中,使用Clustal W程序对从NCBI数据库中获取的光蜥及其他石龙子科部分物种的
COI基因序列,与本研究获得的光蜥标本所测序列进行比对,确保序列的准确对齐。比对完成后,采用Kimura双参数(K2P)模型计算各物种间
COI基因的遗传距离
[8-9],该模型能够有效反映核苷酸序列的进化差异。最后,以变色树蜥(
Calotes versicolor)为外群,基于计算得到遗传距离矩阵,并采用邻接法(neighbor-joining method)构建系统发育树。
2 结果
2.1 形态描述
本次采集的标本体型较小,头体长为63.36 mm,其他部位参数见
表1。标本头部吻短钝圆,吻鳞从上方可见;眼小,鼻孔与耳孔均为圆形,眼睑发达,瞳孔圆形,眶上鳞4枚,耳孔无瓣突,鼓膜深陷;上唇鳞6枚,鳞缘有黑纹,第4枚大(长方形),位于眼的下方,下唇鳞也为6枚;无上鼻鳞,额鳞很长,约为吻端至顶鳞后缘的1/2,其中部两侧内凹,颏鳞略三角形;额鼻鳞与吻鳞、额鳞相接,前额鳞2枚且小,位于头部两侧,额顶鳞2枚,彼此不相接,被顶间鳞分隔;顶鳞2枚且大而不规则,在额顶鳞后缘相接,顶间鳞呈短箭头状四边形,长度和宽度与额顶鳞相似;无明显颈鳞,颊鳞2枚,颞鳞不扩大。
标本体型细长,体表覆有光滑的鳞片,大小均一,整体为棕色,带有一些黑色斑纹;体鳞、背鳞圆覆瓦状排列,环体中段鳞30行,腹鳞光滑无棱,无扩大的肛前鳞;体腹浅黄色,尾腹灰白色;四肢粗短,前肢贴体前伸可达耳孔,前、后肢贴体相向时指趾相距甚远,第Ⅳ趾趾下瓣17枚;尾长略大于头体长,尾部基部粗大,向后渐细尖(
图1,
图2)
2.2 遗传距离
将浙江泰顺采集到的光蜥属标本与广东广州和福建灵江光蜥的
COI基因序列进行比较分析,发现样本之间的遗传距离为0.002~0.004(
表2)。这一数值显著低于不同物种间的遗传距离,低遗传距离表明这些样本在遗传上具有高度的一致性,支持它们属于同一物种——光蜥的结论。
2.3 系统发育关系
本研究以变色树蜥作为外群,选取石龙子科6属12种共20条线粒体
COI基因序列,构建邻接法系统发育树。结果显示,采自浙江泰顺的光蜥属标本与广东广州、福建灵江的光蜥聚为一支(
图3)。这一结果支持光蜥的单系性,进一步证明本次采集标本为光蜥。
2.4 生境描述
采集地海拔约392 m,土壤湿润,属高湿度的亚热带季风气候,植被覆盖率高,以常绿阔叶林为主。光蜥发现于山脚的枯木落叶间(
图4),与其同域分布的两栖爬行动物有北草蜥(
Takydromus septentrionalis)、蓝尾石龙子(
Plestiodon elegans)、舟山眼镜蛇(
Naja atra)、银环蛇(
Bungarus multicinctus)、草腹链蛇(
Amphiesma stolatum)、饰纹姬蛙(
Microhyla fissipes)、泽陆蛙(
Fejervarya multistriata)、天目臭蛙(
Odorrana tianmuii)和橙脊瘰螈(
Paramesotriton aurantius)等。
3 讨论
伴随分子生物学技术的快速发展,整合形态学比较与分子系统学分析的物种鉴定方法已在生物分类学中得到广泛应用。本次新采集的光蜥属标本形态学鉴定特征与光蜥的鉴定特征
[2,6]基本吻合,系统发育分析结果也显示该标本与广东广州、福建灵江的光蜥聚为一支。基于上述结果,确认该标本为光蜥。
在中国,光蜥分布于福建、江西及其南部省份
[5,10]。尽管浙江省与上述地区相邻,此前却未有光蜥的记录。浙江省地处中国东南沿海,位于欧亚大陆与西北太平洋的过渡地带,属典型的亚热带季风气候,四季分明、年气温适中、光照充足、雨量丰沛且雨热同期,高温季节降水较为集中
[11-12]。此类气候为众多生物提供了适宜的生存条件。作为主要栖息于低山丘陵地带的爬行动物,光蜥在浙江泰顺的发现进一步扩大了其已知地理分布范围。
随着生物多样性调查的深入,浙江省已有多篇关于新种和新纪录种的报道。例如,2016年7—8月,于浙江遂昌九龙山和衢州药王山进行两栖爬行动物生物多样性资源调查时,发现了浙江省蜥蜴类分布新纪录——股鳞蜓蜥(
Sphenomorphus incognitus)
[13];2021年6月14日,在浙江舟山衢山岛观音山景区发现了浙江省爬行动物分布新纪录——黄家岭脊蛇(
Achalinus huangjietangi)
[14]。光蜥在浙江的发现不仅为研究其地理分布格局提供了重要的基础资料,还丰富了浙江两栖爬行类物种的多样性。同时,这些新纪录的报道也暗示了浙江的生物资源可能仍被低估,需进一步开展物种资源调查,全面掌握区域物种多样性信息。
浙江省野生动物资源调查、建档、编撰项目
温州陆生野生脊椎动物资源调查项目(WZJHCG-20220302)