糖基印迹电化学传感器的制备及乳腺癌PD-L1阳性外泌体的快速检测

摘要

构建了一种快速识别检测乳腺癌PD-L1阳性外泌体的糖基印迹电化学传感器.以乳腺癌阳性外泌体糖蛋白PD-L1过表达的糖链Galβ1-4GlcNAcβ1-3Galβ1-4GlcNAcβ1-3Gal为模板分子，3-氨基苯硼酸为功能单体，采用电聚合法制备了糖基印迹聚合物（GIP）；经洗脱去除模板分子后得到了可特异性识别PD-L1阳性外泌体的印迹膜.利用铁氰化钾作为探针测量了GIP电极的DPV电流值.用RIPA裂解外泌体扣除游离蛋白干扰，记录电流值变化（ΔI）.ΔI随着重吸附PD-L1阳性外泌体浓度的增大而逐渐降低，并与浓度的对数值呈线性正相关，检测范围为2.36×10～2～1.18×10～7 particles/mL，检出限为93 particles/mL.将该方法用于临床样本中乳腺癌PD-L1阳性外泌体的检测，加标回收率为93.82%～105.32%.通过糖基化程度差异，该传感器可用于临床样本中乳腺癌的筛查.

关键词

外泌体 / 糖基印迹 / 电化学传感器 / PD-L1 / 乳腺癌