肠道共生菌Akkermansia muciniphila编码的重组蛋白Amuc＿0119的表达与纯化

摘要

粘蛋白降解肠道共生菌Akkermansia muciniphila因具有促进健康的效用而备受关注,其蛋白组分在宿主-微生物互作中发挥着重要作用.其中, Amuc＿0119是一类尚未表征的假定蛋白,具有潜在生物学功能.本文旨在构建Amuc＿0119的重组表达系统,以促进其结构和功能研究.将Amuc＿0119编码序列克隆至N端和C端均带有6×His标签的pET-28a(+)载体中,并转化至大肠杆菌BL21(DE3).在37℃下以0.5 mmol/L IPTG过夜诱导表达,经SDS-PAGE分析获得了46 kDa重组蛋白,并通过Ni-NTA亲和层析纯化,其纯度达92.08%. Western blot结果确认为目标蛋白,通过BCA定量测得最终浓度为818.44μg/mL.本文建立了Akkermansia muciniphila来源Amuc＿0119的高效表达与纯化体系,为后续结构及功能研究提供了必要工具.

关键词

粘蛋白降解肠道共生菌(Akkermansia muciniphila) / 益生菌 / Amuc＿0119 / 表达 / 纯化