鸡毛降解蛋白酶基因的异源表达和性质研究

Heterologous Expression and Characterization of Chicken Feather-degrading Protease Gene

摘要

对鸡毛高效降解Deinococcus sp. RM菌株的基因组，及其降解鸡毛过程中的转录组进行测序，筛选出表达量高的蛋白酶基因重组至Pichia pastoris GS115菌株中进行诱导表达，对重组蛋白酶分离纯化、酶学性质以及降解鸡毛的效果进行测定。结果表明，RM菌株共4 132个基因，3 844个基因表达，其中444个基因表达胞外蛋白，26个为胞外蛋白酶。较高表达量的sp02200基因在P. pastoris GS115菌株中获得成功表达，该重组蛋白酶rSp02200属于一种新型热应激需求蛋白家族DegQ类蛋白酶，最适反应温度为37℃，在30℃以下保持较好稳定性，最适pH为7.5，在p H 4.0～11.0能保持70%以上蛋白酶活性，并且能将长、粗的鸡毛羽轴和羽枝降解为细小的羽轴和羽枝。因此，Sp02200蛋白酶是RM菌株降解鸡毛过程中的一种重要酶，这为探究RM菌株降解鸡毛相关基因的研究提供了参考。

关键词

鸡毛降解 / Deinococcus sp. RM菌株 / 转录组 / 克隆表达 / 酶学性质

Key words

chicken feather degradation / Deinococcus sp.RM strain / transcriptome / cloning and expression / enzymatic characteristics

基金资助

广东省基础与应用基础研究项目(2019A1515011089)

广东省科技创新战略专项资金（大学生科技创新培育）资助项目(pdjh2022a0469)

韶关学院第二十二批教育教学改革研究项目(SYJY20211115)

韶关学院2022年度校级“质量工程”建设项目(27)