利用CRISPR/Cas13a编辑技术获得马铃薯抗PVX植株

摘要

为探究利用CRISPR/Cas13a系统获得抗马铃薯X病毒（potato virus X,PVX）马铃薯的可行性，通过设计靶向PVX中TGBp1基因的小向导RNA(small guide RNA,sgRNA)，构建CRISPR/Cas13a基因编辑载体，以马铃薯栽培种Désirée为受体材料进行稳定遗传转化，并通过机械摩擦接种法鉴定转基因植株对PVX的抗性。结果显示，成功构建了靶向PVX的PVX-Cas13a载体，并获得了表达Cas13a的转基因马铃薯植株，对其中3个高表达Cas13a的株系进行PVX抗性鉴定，发现在接种PVX 10～20 d后，转基因植株系统叶上无明显发病症状，且PVX积累量均显著低于未接种PVX对照。表明靶向PVX的CRISPR/Cas13a系统能够有效抑制该病毒的积累，这为马铃薯抗PVX育种提供了一条有效策略。

关键词

马铃薯 / 基因编辑 / CRISPR/Cas13a / 马铃薯X病毒 / 抗性鉴定