苹果树腐烂病菌VmMFS1～VmMFS3基因的功能分析

摘要

为绿色持久防控苹果树腐烂病，该研究分析苹果树腐烂病菌Valsa mali的3个主要协同转运蛋白超家族（major facilitator superfamily,MFS）编码基因的氨基酸序列特征，利用实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR,RT-qPCR）技术分析这3个基因在苹果树腐烂病菌侵染阶段的表达水平，通过构建这3个基因的缺失突变体和回补菌株分析其在病原菌营养生长、致病力和非生物胁迫应答等方面的功能。结果表明，这3个基因的氨基酸序列均具有MFS保守结构域，将其命名为VmMFS1～VmMFS3;VmMFS1和VmMFS2的进化距离较近，均与VmMFS3的进化距离较远；在苹果树腐烂病菌侵染过程中VmMFS1～VmMFS3基因表达均显著上调；与野生型03-8菌株相比，VmMFS1～VmMFS3基因缺失突变体的菌落形态无明显差异，但生长速度下降；VmMFS1～VmMFS3基因缺失突变体的致病力均显著降低；VmMFS1～VmMFS3基因缺失突变体对H₂O₂胁迫的敏感性无明显变化，但对NaCl胁迫更敏感；基因回补后基因缺失突变体的表型缺陷能恢复到野生型菌株的水平。

关键词

非生物胁迫 / 主要协同转运蛋白超家族 / 苹果黑腐皮壳菌 / 致病力 / H₂O₂胁迫 / NaCl胁迫