枣疯病植原体巢式PCR检测方法的建立及应用

赵娟; 程艳丽; 刘亚勇; 孟盼盼; 王甦; 秦文韬

doi:10.13802/j.cnki.zwbhxb.2025.2025034

植物保护学报 ›› 2025, Vol. 52 ›› Issue (04) : 852 -858. DOI: 10.13802/j.cnki.zwbhxb.2025.2025034

枣疯病植原体巢式PCR检测方法的建立及应用

赵娟, 程艳丽, 刘亚勇, 孟盼盼, 王甦, 秦文韬

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摘要

为建立高效、灵敏的枣疯病植原体Candidatus Phytoplasma ziziphi分子检测方法，以植原体secA基因为靶标序列设计并筛选特异性引物，建立枣疯病植原体的巢式PCR检测方法，评价该检测方法的特异性、灵敏度以及对34份枣树样品的检测效果。结果表明：基于两对特异性引物建立的巢式PCR方法能精准从枣树组织中检测到枣疯病植原体；该巢式PCR检测方法对枣疯病植原体的灵敏度为3×10^-4 ng/μL，是普通PCR灵敏度的1 000倍；该检测方法对16份显症枣树样品的检出率为100.0%，对18份无症状枣树样品的检出率达66.7%，明显高于常规PCR。表明所建的枣疯病植原体巢式PCR方法特异性强，灵敏度高，稳定可靠，可用于枣疯病的监测预警及早期科学防控。