枣疯病植原体巢式PCR检测方法的建立及应用

摘要

为建立高效、灵敏的枣疯病植原体Candidatus Phytoplasma ziziphi分子检测方法，以植原体secA基因为靶标序列设计并筛选特异性引物，建立枣疯病植原体的巢式PCR检测方法，评价该检测方法的特异性、灵敏度以及对34份枣树样品的检测效果。结果表明：基于两对特异性引物建立的巢式PCR方法能精准从枣树组织中检测到枣疯病植原体；该巢式PCR检测方法对枣疯病植原体的灵敏度为3×10^-4 ng/μL，是普通PCR灵敏度的1 000倍；该检测方法对16份显症枣树样品的检出率为100.0%，对18份无症状枣树样品的检出率达66.7%，明显高于常规PCR。表明所建的枣疯病植原体巢式PCR方法特异性强，灵敏度高，稳定可靠，可用于枣疯病的监测预警及早期科学防控。

关键词

枣疯病 / 枣疯病植原体 / secA基因 / 巢式PCR / 病原检测 / 灵敏度 / 特异性

基金资助

国家桃产业技术体系枣植保技术岗位科学家(CARS-30); 北京市农林科学院青年科研基金(QNJJ202313);北京市农林科学院创新能力建设专项(KJCX20240405)