烟草棒孢霉叶斑病生防菌GK-6的抗病机制

摘要

为筛选烟草棒孢霉叶斑病的生防菌源，从贵州省遵义市发病烟区的健康烟株中分离内生细菌，以多主棒孢霉Corynespora cassiicola为指示菌进行拮抗菌株的筛选，通过形态特征与多基因序列串联分析对拮抗菌株进行鉴定，利用结晶紫染色法和平板运动性试验解析其生物膜形成能力及群集运动特性，采用盆栽试验评价其对烟草棒孢霉叶斑病的防效，通过分生孢子萌发抑制试验、菌丝生长速率法和基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱技术探究其抑菌机制，并采用绿色荧光蛋白标记法测定其在烟株中的定殖动态。结果表明：筛选获得1株对多主棒孢霉有较高抑制作用的菌株，抑制率达63.75%，命名为GK-6，并被鉴定为贝莱斯芽胞杆菌Bacillus velezensis。该菌株表现出较强的生物膜形成能力及群集运动特性；其对烟草棒孢霉叶斑病的防效为41.67%；经菌株GK-6发酵上清液处理96 h的多主棒孢霉分生孢子萌发率仅为64.67%，显著低于阴性对照组（100.00%）；其粗提物对多主棒孢霉的EC₅₀为0.032 mg/mL，且含有丰原素、表面活性素、杆菌霉素等抗菌物质。该菌株可在烟株叶部稳定定殖，接种后35 d仍可检测到2.87×10～3 CFU/g的定殖量。表明贝莱斯芽胞杆菌GK-6具有开发为生物农药的潜力。

关键词

烟草棒孢霉叶斑病 / 多主棒孢霉 / 贝莱斯芽胞杆菌 / 脂肽 / 分生孢子萌发