重组蛋白Fpr3的原核表达、纯化与多克隆抗体的制备

伍翔; 祁超; 李伟国; 刘中来

doi:10.19603/j.cnki.1000-1190.2010.01.027

华中师范大学学报（自然科学版） ›› 2010, Vol. 44 ›› Issue (01) : 120 -124. DOI: 10.19603/j.cnki.1000-1190.2010.01.027

重组蛋白Fpr3的原核表达、纯化与多克隆抗体的制备

伍翔, 祁超, 李伟国, 刘中来

作者信息 +

Author information +

文章历史 +

PDF

摘要

为了从分子水平上进一步研究PPIase与PP1的相互作用,将构建好的pGEX-5X-1重组表达质粒转化于受体菌BL21(DE3)感受态细胞中,用IPTG诱导后得到了可溶形式表达的融合蛋白.采用GST亲和层析法对重组蛋白进行了纯化,并用Factor Xa对融合蛋白进行柱上酶切,SDSPAGE检测表明可获得较高纯度的GST-Fpr3融合蛋白以及去除GST标签的目的蛋白.用其免疫日本雄性大耳白兔,成功制备了抗GST-Fpr3的多克隆抗体,为Fpr3的空间结构的解析和相应的分子识别过程奠定了基础.