1株脂肪酶产生菌的筛选鉴定及其脂肪酶基因的克隆表达

刘义; 孟丽君; 楼梦; 姚汉超; 刘修齐; 刘小兰; 俆可瀚; 李娜; 刘德立

doi:10.19603/j.cnki.1000-1190.2011.03.021

华中师范大学学报（自然科学版） ›› 2011, Vol. 45 ›› Issue (03) : 444 -449. DOI: 10.19603/j.cnki.1000-1190.2011.03.021

1株脂肪酶产生菌的筛选鉴定及其脂肪酶基因的克隆表达

刘义, 孟丽君, 楼梦, 姚汉超, 刘修齐, 刘小兰, 俆可瀚, 李娜, 刘德立

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摘要

从武汉市郊蓖麻地土壤中分离到1株产脂肪酶菌株,结合形态观察和生理生化鉴定,扩增16SrDNA并测序,运用Blast比对构建了进化树,发现该菌与粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)的同源性高达99%,初步鉴定该菌属于沙雷氏菌属(Serratia),命名为Serratiasp.HS-L5.克隆了脂肪酶基因HS-Lip5,该基因全长1 842bp,编码氨基酸614个.序列经Blast比对分析发现与Serratia marcescens SM6的lipA序列的同源性高达98%,经氨基酸序列初步分析,发现Serratiasp.HS-L5的氨基酸序列包含脂肪酶共有序列-G-X-S-X-G-.将HS-Lip5基因克隆到表达载体pET-28a,并在E.coli中获得了表达.