一种新型有机磷降解酶的二异丙基氟磷酸酯水解特性研究

问县芳; 袁永泽; 习海玲; 钟近艺; 陈立坤; 王攀; 肖文精; 刘德立

doi:10.19603/j.cnki.1000-1190.2013.01.013

华中师范大学学报（自然科学版） ›› 2013, Vol. 47 ›› Issue (01) : 53 -56. DOI: 10.19603/j.cnki.1000-1190.2013.01.013

一种新型有机磷降解酶的二异丙基氟磷酸酯水解特性研究

问县芳, 袁永泽, 习海玲, 钟近艺, 陈立坤, 王攀, 肖文精, 刘德立

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摘要

有机磷降解酶是降解有机磷化合物(包括神经毒剂)的一类重要酶.本实验室克隆了铜绿假单胞菌HS-D38的有机磷降解酶基因opd(organophosphate degradation),并经定点突变与原核表达获得了一种新型重组有机磷降解酶OPD.本文研究了该重组有机磷降解酶OPD的分离纯化,及其降解有机磷神经毒剂模拟剂二异丙基氟磷酸酯(diisopropyl fluorophosphate,DFP)的性质.研究结果表明,重组有机磷水解酶OPD经Ni-NTA亲和色谱纯化后,比活力达到了218U/mg.该酶的最适温度为35℃,最适pH为8.0;金属离子Zn2+、Cr2+、Co2+对酶活性有激活作用.重组有机磷水解酶OPD对DFP的Km为1.05mmol.L-1,Vm为0.218mmol.L-1.min-1.