海洋放线菌S.areniocola CNS-205腺苷化结构域基因的克隆、表达和纯化

陆胜利; 祁超

doi:10.19603/j.cnki.1000-1190.2014.06.017

华中师范大学学报（自然科学版） ›› 2014, Vol. 48 ›› Issue (06) : 876 -884. DOI: 10.19603/j.cnki.1000-1190.2014.06.017

海洋放线菌S.areniocola CNS-205腺苷化结构域基因的克隆、表达和纯化

陆胜利, 祁超

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摘要

海洋放线菌S.arenicola CNS-205是首次报道的专属海洋性放线菌属Salinispora的代表菌株之一.选取海洋放线菌S.arenicola CNS-205非核糖体多肽合成酶氨基酸腺苷化结构域基因sare 0357,对其进行生物信息学分析后进行原核重组质粒的构建和表达及蛋白纯化.分别构建了pET-28a-sare 0357和pGEX-KG-sare 0357重组质粒,并转化E.coli BL21(DE3)进行不同诱导条件的诱导表达,sare 0357基因均以包涵体的形式表达.收集Sare0357重组蛋白包涵体,选取6mol/L的盐酸胍对其进行变性并将变性后的重组蛋白进行镍柱纯化.得到了可溶性的Sare0357融合蛋白.