脂质纳米颗粒封装EV71病毒的技术路线及其溶瘤效应初探

摘要

脂质体纳米颗粒(LNP)递送系的发展为EV71溶瘤病毒给药方式提供了新的思路.为提升EV71溶瘤病毒递送效率，采用微流控包封法对EV71mRNA进行包封，简单高效地制备了EV71脂质体纳米颗粒(EV71@ONP)并通过纳米粒度电位仪检测其粒径和包封率.EV71@ONP转染人恶性胚胎横纹肌瘤RD细胞后可成功生产出EV71病毒，且转染小鼠单核巨噬细胞RAW264.7后细胞上清中TNF-a水平无显著变化，表明其具有良好的活性与较低地免疫原性.CCK-8法检测细胞毒性发现，24 h时EV71@ONP(0.2μg)处理组人结肠癌HT29细胞存活率显著低于EV71活病毒(MOI=0.1)处理组，流式检测也显示早期和晚期凋亡细胞增多，但对人正常结肠上皮NCM460细胞毒性较小，表明EV71@ONP在体外具有较好的结肠癌细胞生长抑制效应与安全性.进一步构建HT29-BALB/c裸鼠移植瘤模型探究发现，EV71@ONP处理后的裸鼠肿瘤生长受到显著抑制，表明其在体内也具有良好抑瘤效应.上述结果表明，该EV71脂质体纳米颗粒封装技术有望进一步拓宽EV71病毒在癌症治疗中的应用.

关键词

溶瘤纳米颗粒 / 结肠癌细胞 / 脂质纳米颗粒 / EV71病毒