梨形环棱螺qRT-PCR内参基因的筛选

郭雪朋; 文衍红; 罗福广; 王志强; 祝东梅; 周小云

doi:10.13300/j.cnki.hnlkxb.2025.06.025

华中农业大学学报 ›› 2025, Vol. 44 ›› Issue (06) : 253 -262. DOI: 10.13300/j.cnki.hnlkxb.2025.06.025

梨形环棱螺qRT-PCR内参基因的筛选

郭雪朋, 文衍红, 罗福广, 王志强, 祝东梅, 周小云

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摘要

为筛选梨形环棱螺（Bellamya purificata）在不同发育阶段、不同组织以及性别间各组织中表达稳定的最佳qRT-PCR内参基因，分别用geNorm、NormFinder、BestKeeper软件和比较ΔCt法，以及综合分析软件RefFinder评估actβ、18S、gapdh、ef1α、ef1β、rps3、rpl4、tubα、tubβ和sdha共10个候选基因在梨形环棱螺的胚胎阶段、幼螺阶段和雌雄成螺各组织中的表达稳定性。结果显示，候选内参基因在胚胎和幼螺阶段的表达稳定性依次为gapdh>tubα>18S>ef1α>ef1β>rps3>actβ>tubβ>sdha>rpl4，在雌螺各组织中的表达稳定性依次为ef1β>tubα>rps3>ef1α>18S>actβ>gapdh>sdha>tubβ>rpl4，在雄螺各组织中的稳定性依次为ef1α>rps3>ef1β>rpl4>tubα>actβ>18S>gapdh>tubβ>sdha，在性别间各组织中的稳定性依次为ef1β>ef1α>rps3>tubα>18S>actβ>gapdh>rpl4>sdha>tubβ。上述结果表明，gapdh和tubα为胚胎和幼螺阶段较适宜的qRT-PCR内参基因，ef1β和tubα为雌螺组织间较适宜的qRT-PCR内参基因，ef1α和rps3为雄螺组织间较适宜的qRT-PCR内参基因，ef1α和ef1β为性别间较适宜的qRT-PCR内参基因。