去甲基化酶Tet2缺失对MRSA诱导的小鼠皮肤自噬功能及炎症反应的影响

摘要

为探讨10-11易位双加氧酶2（ten-eleven translocation 2,Tet2）在耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA）感染中对皮肤炎症反应和自噬功能的影响，在C57BL/6J野生型(Tet2^+/+)和Tet2基因敲除型(Tet2^-/-)小鼠皮下接种MRSA以建立小鼠皮肤脓肿模型，观察记录小鼠皮肤损伤变化和测定组织菌载量，并检测炎性因子及自噬相关基因的表达。结果发现，与Tet2^+/+小鼠相比，Tet2^-/-小鼠感染MRSA后表现出更严重的皮肤损伤和更高的组织菌载量（P<0.01）。组织病理学观察显示，Tet2^-/-小鼠感染部位表现为表皮和真皮明显增厚、胶原纤维断裂、皮脂腺萎缩、毛囊消失及大量炎性细胞浸润；透射电镜观察显示，Tet2^+/+小鼠感染部位出现明显的自噬体结构，而在Tet2^-/-小鼠感染部位未发现自噬相关结构。实时荧光定量PCR检测结果显示，Tet2缺失后小鼠促炎因子IL-1β和TNF-α的mRNA表达水平极显著上调（P<0.01），抑炎性因子IL-10（P<0.05）和TGF-β的mRNA表达显著下调（P<0.001），自噬标志物Sqstm1表达增加（P<0.01），而Map1lc3b表达降低（P<0.01）。免疫组化结果进一步证实，Tet2^-/-小鼠感染MRSA后p62蛋白表达升高，而LC3b表达降低。试验结果表明，Tet2通过调控自噬过程参与MRSA感染的免疫防御，Tet2缺失后导致自噬受阻和炎症反应失调，从而加重感染小鼠的皮肤组织损伤。

关键词

10-11易位双加氧酶2 / 基因敲除 / 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 / 皮肤损伤 / 自噬 / 炎症反应