基于网络药理学和细胞实验探究异绿原酸A对阿尔茨海默病的干预作用

摘要

目的:基于网络药理学探究异绿原酸A（isochlorogenic acid A,IAA）干预阿尔茨海默病（Alzheimer's disease, AD）的作用机制，并利用细胞实验进行验证。方法:通过网络药理学相关数据库获取IAA及AD的靶点，构建“药物-疾病”网络图，对筛选得到的交集靶点进行GO生物学过程富集分析和KEGG通路富集分析，并对核心靶点进行分子对接。利用β-淀粉样肽25～35(β amyloid peptide-25～35,Aβ_25～35)诱导高分化PC12（PC12-H）细胞及N9细胞构建AD细胞模型，检测细胞活力、凋亡、活性氧、关键靶点mRNA以及通路相关蛋白水平。结果:网络药理学结果表明，IAA干预AD的靶点有23个，与MAPK和EGFR/Ras/ERK等信号通路有关。分子对接结果显示，IAA与核心靶蛋白表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor, EGFR）、β淀粉样前体蛋白（beta-amyloid precursor protein, APP）、β-分泌酶1（beta-site amyloid precursor protein cleaving enzyme 1,BACE1）及激酶插入区受体（kinase insert domain receptor, KDR）亲和力较强。细胞实验结果表明，IAA能显著提高Aβ_25～35诱导的PC12-H与N9细胞活力，降低细胞内凋亡相关蛋白及mRNA水平，同时降低EGFR,APP,BACE1的mRNA水平并调节EGFR/Ras/ERK通路相关蛋白表达。结论:网络药理学分析结果显示，IAA对AD的干预作用涉及APP,EGFR,KDR,BACE1等靶点；细胞实验结果表明，IAA干预AD的机制与激活EGFR/Ras/ERK通路抑制细胞凋亡有关。

关键词

异绿原酸A / 阿尔茨海默病 / EGFR/Ras/ERK通路 / 细胞凋亡