基于超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱串联质谱联用技术结合网络药理学分析仙灵骨葆胶囊的化学成分和作用机制

摘要

目的:通过超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱串联质谱联用技术结合网络药理学，研究仙灵骨葆胶囊(Xianling Gubao capsules, XLGBC)治疗骨质疏松(osteoporosis, OP)的有效化学成分及潜在作用机制。方法:采用Hypersil Gold色谱柱，以0.1%甲酸水溶液(A)-0.1%甲酸乙腈溶液(B)作为流动相进行梯度洗脱；质谱在正、负离子模式下扫描；建立XLGBC化学成分数据库，结合Xcalibur软件，对比准分子离子和特征碎片离子，进行化学成分鉴定；利用TCMSP和SwissADME数据库筛选候选活性成分，并通过GeneGards, DisGeNET,SwissTargetPrediction和Metascape数据库对活性成分治疗OP的靶点进行预测和富集分析，再结合String平台和Cytoscape软件获取XLGBC抗OP的关键靶点和重要活性成分，利用分子对接技术进行初步验证。结果:共鉴定出120个化学成分，其中5个成分首次在XLGBC中鉴定得到；120个化学组分中筛选到63个治疗OP的候选活性成分和447个靶点，富集分析显示主要涉及激素水平调节、破骨细胞分化、PI3K-AKT信号通路等途径，其中EGFR和PIK3R1靶点与多条通路联系密切，被视为关键靶蛋白；通过蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction, PPI)网络拓扑分析获取到XLGBC治疗OP的6个主要核心成分，分子对接表明该成分与关键靶蛋白均具有较强烈的结合活性。结论:全面阐明了XLGBC中的各类化学成分，并揭示了XLGBC作用于OP的主要化学成分和潜在作用机制，为XLGBC的药效物质基础研究提供科学参考。

关键词

仙灵骨葆胶囊 / 化学成分 / 骨质疏松 / 超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱串联质谱联用技术 / 网络药理学 / 分子对接