均相时间分辨荧光法测定依柯胰岛素生物学活性

摘要

目的:利用均相时间分辨荧光免疫分析技术建立依柯胰岛素生物学活性检测方法。方法:以CHO-INSR B1284细胞系为靶细胞，通过对药物的量效范围、刺激时间、靶细胞接种密度进行优化建立依柯胰岛素测活方法，根据《中华人民共和国药典》2020年版四部通则9401开展全面的方法学验证，并将本研究建立的方法应用于依柯胰岛素原料药、注射液及其他人胰岛素类似物的相对效价测定。结果:依柯胰岛素在该方法中存在量效关系，且符合四参数方程y=（A-D）/[1+（x/C）^B]+D。该方法具有良好的专属性，5个效价水平（50%,80%,100%,125%,200%）的几何均值、相对偏倚、几何变异系数（geometric coefficients of variation, GCV,%）均符合《中华人民共和国药典》2020年版四部通则9401的要求。采用该方法检测3批依柯胰岛素原料药和3批制剂的相对效价，所得剂量-效应曲线的线性、回归性和平行性均可通过可靠性测验，能有效检测依柯胰岛素及其他胰岛素类似物的生物学活性。结论:本研究建立的依柯胰岛素生物学活性检测方法操作简便、耗时短、准确度高、精密度好，可作为依柯胰岛素的生物学活性评价方法。

关键词

依柯胰岛素 / 质量控制 / 生物学活性 / 均相时间分辨荧光技术 / 方法学验证