细叶远志皂苷对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠的影响及机制

摘要

目的:探究细叶远志皂苷（tenuifolin,TEN）对多发性硬化（multiple sclerosis,MS）动物模型实验性自身免疫性脑脊髓炎（experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE）小鼠的治疗效果及其对T细胞的免疫机制。方法:将30只C57BL/6雄鼠随机平均分为3组:Normal组、EAE模型组、TEN组(30 mg·kg^-1)。模型组和TEN组采用结核分枝杆菌和髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35～55氨基酸片段(myelin oligodendrocyte glycoprotein amino acid 35～55 fragment,MOG_35～55)建立EAE模型，免疫当天，TEN组给予TEN干预，记录TEN对EAE小鼠神经行为学评分。d 21取小鼠脊髓制备成冰冻切片，并采用苏木素伊红染色和固蓝染色观察其髓鞘组织病理改变情况，免疫荧光染色观察髓鞘碱性蛋白（myelin basic protein,MBP）表达变化; Western Blot检测脊髓组织中Toll样受体4（Toll-like receptor 4,TLR4 ）、核因子κB抗体（nuclear factor kappa-B,NF-κB）通路的蛋白表达;流式细胞术检测小鼠脾脏、淋巴结中T细胞亚群百分比。结果:与EAE模型组相比，TEN干预组EAE小鼠神经行为学评分降低，髓鞘脱失情况改善，炎性细胞浸润减少，TLR4/NF-κB通路蛋白表达降低;下调脾脏IFN-γ⁺CD4⁺T细胞、IL-17⁺CD4⁺T细胞比例，上调Foxp3⁺CD4⁺T细胞比例，抑制脾细胞中炎症因子干扰素-γ（interferon-gamma,IFN-γ）、白细胞介素-17（interleukin-17,IL-17）的释放，促进抑炎因子转化生长因子β（transforming growth factor β,TGF-β）的释放。结论:TEN可能通过调节T细胞亚群比例减轻炎症反应，改善EAE小鼠的临床症状。

关键词

细叶远志皂苷 / 实验性自身免疫性脑脊髓炎 / 神经炎症 / T细胞 / 免疫调节