基于报告基因法检测CpG QCX1佐剂体外生物活性方法的建立和验证

摘要

目的:建立并验证基于报告基因法的CpG QCX1佐剂体外生物活性检测方法。方法:按ICH Q2（R2）和《中华人民共和国药典》2020年版三部通则9401指导原则并结合实验设计（design of experiment, DOE）优化分析方法，并验证方法的特异性、相对准确度、中间精密度、线性和范围。结果:建立的方法确定待测样品浓度范围为0.195～50μg·mL^-1,稀释倍数为1∶2,细胞浓度为4.5×10～5个·mL^-1,孵育时间为16 h。该方法可特异性检测CpG QCX1,在50%～185%的线性范围内，5个活性水平的相对偏倚为-2.7%～-1.0%,几何变异系数<10%,线性回归相关系数r=0.996,均满足要求。结论:本研究建立的检测方法具有良好的特异性、准确性、稳健性和耐用性，可用于相关CpG产品的质量控制。

关键词

CpG QCX1 / 体外生物活性 / 方法建立 / 方法验证 / 质量控制