基于网络药理学和体外实验探讨广金钱草缓解胆汁淤积性肝病的作用机制

摘要

目的:本研究基于超高效液相色谱-串联质谱技术(UPLC-MS/MS)、网络药理学、分子对接和细胞实验探究广金钱草提取物[Desmodium styracifolium(Osb.) Merr extracts,DME]潜在活性成分对胆汁淤积性肝病(cholestatic liver disease,CLD)的作用靶点和机制。方法:通过UPLC-MS/MS检测DME成分，使用TCMSP,SwissTargetPrediction数据库筛选其潜在活性成分并预测作用靶点。使用OMIM,GeneCards等数据库对CLD的靶点进行预测，同时利用GEO数据库检索得到临床样本数据集并获得差异基因，对数据筛选后得到关键靶点。通过分子对接技术分析核心靶点与DME潜在活性成分的结合关系，最后采用细胞实验验证。结果:UPLC-MS/MS检测结果结合数据库筛选得到26种潜在活性成分，并得到其作用靶点497个。数据库筛选CLD靶点2 393个，临床样本分析得到成人组和未成年组差异基因分别为6 684和6 519个，得到交集基因50个。KEGG富集分析结合文献分析选出与CLD相关的胆汁分泌途径。对临床样本差异基因再次分析后确定关键基因NR1H4[编码法尼醇X受体(farnesoid X receptor,FXR)蛋白]。分子对接结果显示，有7种成分与FXR有较高的结合能。表面等离子共振技术(surface plasmon resonance,SPR)结果证实，DME潜在活性成分中夏佛塔苷与FXR亲和力较强。细胞实验结果表明，与石胆酸组相比，DME能上调细胞中FXR的水平。结论:DME中的夏佛塔苷、黄豆黄素和异牡荆素等潜在活性成分可通过调控胆汁分泌通路上的关键靶点FXR，发挥治疗CLD的作用。

关键词

广金钱草 / 胆汁淤积性肝病 / 网络药理学 / 超高效液相色谱-串联质谱技术