肝纤维化或肝硬化所致肝组织结构改变对免疫组化石蜡切片皱缩系数的影响

摘要

目的:比较研究正常、纤维化和硬化肝组织经石蜡包埋、切片和免疫组化染色等组织处理之后的皱缩系数,以探讨肝纤维化或肝硬化所致肝组织结构改变对其皱缩系数有无影响。方法:16只健康3月龄SD大鼠随机分为对照组（n=6）、肝纤维化模型组（n=5）、肝硬化模型组（n=5）。造模结束后从每只大鼠肝脏随机切取一个约2 mm厚的组织块称重和测密度以估计组织块在处理前的体积（VF=肝脏重量/密度）。每个组织块行石蜡包埋后切成14μm厚（H’）的连续切片,按照等距随机的方法每10张切片抽选1张行免疫组化染色（即切片抽样分数f=1/10）,利用VIS体视学系统在测量所抽选切片的面积（A）和实际厚度（H）。根据卡瓦列里原理分别估计每个组织块经包埋处理后的体积（V_E=∑H'×A×1/f）和经包埋切片染色等处理后的体积（V_S=∑H×A×1/f）,用包埋切片染色后（V_S）的体积除以其处理前的体积（V_F）可得到包埋切片染色过程产生的皱缩系数;其中包埋过程产生的皱缩系数为V_E/V_F,切片和染色过程产生的皱缩系数为V_S/V_E。结果:正常、肝纤维化和肝硬化肝组织经包埋切片染色等处理过程产生的皱缩系数分别约是（61.8±8.33）%、（55.2±13.8）%和（63.0±14.3）%,其中,包埋过程产生的皱缩系数分别约为（77.5±10.3）%、（70.0±18.6）%和（77.8±15.3）%,切片和染色过程产生的皱缩系数分别是（79.7±2.14）%、（80.0%±26.3）%、（80.1±1.16）%。三组之间的差异均无统计学意义。结论:石蜡包埋、切片和免疫组化染色步骤均会导致肝组织产生一定程度的组织皱缩。肝纤维化或肝硬化所致肝组织结构改变对其经过石蜡包埋、切片和免疫组化染色等组织处理后产生的皱缩系数无显著影响。

关键词

体视学 / 肝硬化 / 肝纤维化 / 免疫组化染色 / 石蜡包埋 / 皱缩系数